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技術(shù)文章

抗性淀粉(RS)植物ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理

閱讀:1950          發(fā)布時(shí)間:2018-3-16

抗性淀粉(RS)植物ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理:
    應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中植物抗性淀粉(RS)水平。用純化的植物抗性淀粉(RS)捕獲抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被的微孔中依次加入植物抗性淀粉(RS),再與HRP標(biāo)記的檢測抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的植物抗性淀粉(RS)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中植物抗性淀粉(RS)含量。

                            
抗性淀粉(RS)植物ELISA試劑盒計(jì)算方法:
    以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo), 在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。 

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