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ＲＤ“人可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導配體試劑盒 "質(zhì)量保證，公司主要供應人、小鼠、大鼠、豚鼠、兔子、犬、雞、馬、猴、羊、豬、牛等各類植物動物ELISA試劑盒,更多信息歡迎您。

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人可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導配體試劑盒規(guī)格：96人份/48人份

英文名稱：Human soluble tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand,sTRAIL ELISA  KIT

保存條件：2-8℃

檢測方法：酶聯(lián)免疫法/酶免法（ELISA）

經(jīng)營種類：進口分裝和原裝

主要作用：科研

產(chǎn)品用途：For laboratory use only,Not for drug or other uses.本公司可提供免費代測服務.。

預期應用：ELISA法定量測定血清、血漿或其它相關(guān)生物液體中人可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導配體試劑盒含量。

實驗原理：

　　

　　本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠皮質(zhì)酮（CORT）水平。用純化的大鼠皮質(zhì)酮（CORT）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入皮質(zhì)酮（CORT），再與HRP標記的羊抗鼠抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠皮質(zhì)酮（CORT）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中大鼠皮質(zhì)酮（CORT）濃度。

　　　試劑盒組成

1	30倍濃縮洗滌液	20ml×1瓶	7	終止液	6ml×1瓶
2	酶標試劑	6ml×1瓶	8	標準品（160pg/ml）	0.5ml×1瓶
3	酶標包被板	12孔×8條	9	標準品稀釋液	1.5ml×1瓶
4	樣品稀釋液	6ml×1瓶	10	說明書	1份
5	顯色劑A液	6ml×1瓶	11	封板膜	2張
6	顯色劑B液	6ml×1/瓶	12	密封袋	1個

標本要求

1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融

2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

操作步驟

1.         標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

80pg/ml	5號標準品	150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
40pg/ml	4號標準品	150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
20pg/ml	3號標準品	150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
10pg/ml	2號標準品	150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
5pg/ml	1號標準品	150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液

 

2.         加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

3.         溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。 

4.         配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5.         洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

6.         加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

7.         溫育：操作同3。

8.         洗滌：操作同5。

9.         顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10.     終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。

11.     測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

計算

  以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。

注意事項

1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。

3．各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

4． 請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。

5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物請避光保存。

7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9．本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。

保存條件及有效期

1．試劑盒保存：；2-8℃。

2．有效期：6個月

    公司秉承“專注品質(zhì)、信守承諾、積極溝通、創(chuàng)新服務”的企業(yè)文化積極參與生物領(lǐng)域的技術(shù)創(chuàng)新和技術(shù)服務，力求為我國科研事業(yè)添磚加瓦。

 

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