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技術(shù)文章

干擾素蛋白表達(dá)問題解答

閱讀:1006          發(fā)布時(shí)間:2014-4-8

干擾素蛋白表達(dá)問題解答


請教各位幾個(gè)問題:我用pGEX-6p-1做的干擾素蛋白表達(dá)
問題1:采用一系列不同尿素濃度的復(fù)性緩沖液進(jìn)行復(fù)性,這一系列復(fù)性緩沖液可以重復(fù)利用嗎?如果還有其他蛋白可以同時(shí)使用進(jìn)行復(fù)性嗎?

答案1.現(xiàn)用現(xiàn)配,因?yàn)槭褂煤蟮南盗芯彌_液各種成分(尿素,氧化型還原型谷胱甘肽等)濃度改變,你根本不好確定下次復(fù)性時(shí)的準(zhǔn)確條件,重復(fù)性不好把握;
問題2:復(fù)性后,不經(jīng)過過柱純化直接進(jìn)行抗病毒活性檢測可以嗎?

答案2.不經(jīng)過柱純化,直接用融合蛋白進(jìn)行抗病毒活性檢測么?那標(biāo)簽GST怎么辦,應(yīng)該上柱后酶切再收集目的蛋白檢測吧;
問題3:檢測有活性后可以直接用來免疫動(dòng)物嗎?(同樣是未經(jīng)過柱純化)

答案3.結(jié)論同上。

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