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技術(shù)文章

葡聚糖凝膠 LH-20使用說明

閱讀:3577          發(fā)布時(shí)間:2014-7-23

                  葡聚糖凝膠 LH-20的使用方法

將干粉浸泡于60-70%乙醇中(充分?jǐn)嚢瑁?,洗去可能存在的殘留物,抽干然后濕態(tài)不間隙裝柱,不能出現(xiàn)凝膠斷層(否則要重新裝柱),動(dòng)態(tài)用一倍柱體積的60-70%乙醇淋洗,再用水洗凈乙醇即根據(jù)自己選用洗脫液平衡層析柱至少兩個(gè)柱體積直到基線變得平穩(wěn)為止,如改變?nèi)軇?yīng)該注意凝膠在新溶劑中的溶脹性質(zhì),并根據(jù)性質(zhì)確定柱高。如使用相同的溶劑,在以后的層析中柱平衡可以省略。

1 選擇條件:

梯度洗脫在葡聚糖凝膠 LH-20使用中并不象在正相柱層析中那么重要。首先你的樣品須要能溶解在盡量少量的洗脫劑中。極性在的用甲醇水系統(tǒng);極性小者一般用不含水的系統(tǒng),常用正己烷二-氯-甲烷甲醇系統(tǒng)。

2飽和層析柱:

用洗脫劑將凝膠搖勻,直立柱身,讓其自然沉降,此時(shí)要防止氣泡留在其中。至少半小時(shí)打開開關(guān),流出幾個(gè)柱體種的洗脫劑,目的是使其膨脹在正確比例的洗脫劑中。

3樣品處理:

用盡量少的洗脫劑溶解樣品,常壓過濾。

4)濕法上柱:

這也是要有技巧的步驟。
    5洗脫:

控制流速,一般1drop/s以下,可參見廠家的一些參數(shù);必要時(shí)更改極性(很多時(shí)一個(gè)極性就可以將樣品洗脫完畢)。

6再生以備下次使用。

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