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微載體培養(yǎng)的原理
閱讀：921 發(fā)布時(shí)間：2013-6-13微載體培養(yǎng)技術(shù)（micro-carrier culture technique）于1967年被用于動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)。經(jīng)過三十余年的發(fā)展，該技術(shù)日趨完善和成熟，廣泛應(yīng)用于生產(chǎn)疫苗、基因工程產(chǎn)品等。
微載體是指直徑60-250 μm，能適用于貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)的微珠。一般是由天然葡聚糖或者各種合成的聚合物組成。。它是用固體小珠作為細(xì)胞附著載體進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的一種技術(shù)。
微載體培養(yǎng)原理是將對(duì)細(xì)胞無(wú)害的微載體顆粒加入培養(yǎng)容器的培養(yǎng)液中，作為載體，使細(xì)胞在微載體表面附著生長(zhǎng)，同時(shí)通過持續(xù)攪動(dòng)使微載體始終保持懸浮狀態(tài)。 貼壁依賴性細(xì)胞在微載體表面上的增殖，要經(jīng)歷黏附貼壁、生長(zhǎng)和擴(kuò)增三個(gè)階段。細(xì)胞只有貼附在固體基質(zhì)表面才能增殖，因此細(xì)胞在微載體表面的貼附是進(jìn)一步鋪展和生長(zhǎng)的關(guān)鍵。細(xì)胞主要通過靜電引力和范德華力與微載體黏附，這取決于細(xì)胞與微載體的接觸概率和相融性。
由于動(dòng)物細(xì)胞無(wú)細(xì)胞壁，對(duì)剪切力敏感，因此微載體培養(yǎng)在操作中對(duì)攪拌轉(zhuǎn)速及攪拌方式的要求都十分嚴(yán)格。微載體培養(yǎng)要求攪拌的速度非常慢，zui大速度75 r/min。細(xì)胞微載體培養(yǎng)通常分為三個(gè)時(shí)期：貼壁期，過渡期和培養(yǎng)期。貼壁期和過渡期可以使用超低速細(xì)胞磁力攪拌系統(tǒng)進(jìn)行培養(yǎng)，該系統(tǒng)具有超低的攪拌速度，剪切力小且能在低速下充分混勻細(xì)胞。