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培養(yǎng)基與器材如何才能保證無菌條件
閱讀:852 發(fā)布時間:2014-7-14培養(yǎng)基與器材如何才能保證無菌條件
根據(jù)上海恒遠生物組織細胞培養(yǎng)工作中,可以從以下幾方面來預防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基沖加入適量的抗生素。
抗生素主要用于消毒培養(yǎng)液,是培養(yǎng)基過程中預防微生物污染的重要手段,也是微生物污染不嚴重時的“急救”方法。不同抗生素殺滅微生物不同,應根據(jù)需要選擇。
在細胞培養(yǎng)過程中如果發(fā)現(xiàn)破碎的細胞甚多,培養(yǎng)細胞需要頻繁改善營養(yǎng)環(huán)境才能支持長期傳代培養(yǎng)時,應該懷疑支原體污染。支原體污染難以觀察特殊的外觀變化,培養(yǎng)液也不渾濁。
培養(yǎng)基支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有:抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。要注意的是:支原體沒有細胞壁,故作用于細胞壁生物合成的抗生素,如內酰胺類、萬古霉素等是不敏感的;對多粘菌素、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體zui有抑制活性抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內酯類等,氨基糖苷類、氯霉素對支原體有較小的抑制作用。必要時更換所有培養(yǎng)用物。通常,濾過除菌的方法對支原體是沒有作用的。
上海恒遠生物小編教您正確貯藏“培養(yǎng)基”:
應根據(jù)使用說明書上的要求進行儲存。培養(yǎng)基標簽上應標有批號,生產日期、有效期及培養(yǎng)基的有關特性。所采用的保藏和運輸條件應使培養(yǎng)基zui低限度失去水分并提供機械保護。