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方法步驟：
1） 尿素洗過夜的轉(zhuǎn)印紙?jiān)僖?0 mL PBST 洗三次，每次約10 min，均在上述方形培養(yǎng)皿中進(jìn)行。
2） 轉(zhuǎn)印紙放在明膠NET 溶液中反應(yīng)，置室溫中反應(yīng)1 h。一般使用方形培養(yǎng)皿當(dāng)容器，但亦可裝入塑料袋中反應(yīng)，較節(jié)省試劑用量。
3） 反應(yīng)后，以PBST 浸洗二次。
4） 把轉(zhuǎn)印紙放在抗體溶液中反應(yīng)，置室溫反應(yīng)1 h。
5） 反應(yīng)后以PBST 洗三次，改用酶聯(lián)體反應(yīng)，在室溫下反應(yīng)1 h。
6） 以PBST 洗四至五次，注意容器也要洗干凈。
7） 加入DAB 基質(zhì)溶液約10 mL 呈色，盡量避光，并且不時(shí)搖動(dòng)呈色液。
8） 數(shù)分鐘內(nèi)可呈色，在背景加深前倒去DAB，以水沖過數(shù)次后晾干。
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