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夾心ELISA檢測(cè)與鑒定熱不穩(wěn)定腸毒素

  此法的包被物可用抗LT抗體或LT受體成分(GM神經(jīng)節(jié)背脂)兩種。試驗(yàn)時(shí)，先用1：5O稀釋的粗制兔抗LT血清或5O／lg／ml GM神經(jīng)節(jié)背脂包被塑料板。包被后，加入待檢菌的37℃振搖培養(yǎng)18h的腦心浸液培養(yǎng)物濾液2OOμL，每份樣品平行加2孔，按常法溫育，洗滌后，加1：500稀釋的粗制羊抗LT血清，孵育，洗滌，再加1：4OO的兔抗羊IgG堿性磷酸酶復(fù)合物，以六水合物(hexahydrate)作底物顯色，測(cè)OD450值，以O(shè)D450≥0．2O判為陽性。據(jù)Klipstein等報(bào)道，此法若以粗制LT血清為固相，其檢測(cè)靈敏度為185pg／ml的LT；以GM作固相，則可檢出290pg／m1，且無假陽性。

 

    除上法外，有人已報(bào)道用GMl競(jìng)爭(zhēng)·ETISA檢測(cè)LT；也有報(bào)道用雙夾心ELISA，可用于檢測(cè)和定量豬源LT。