PEG1000溶液公司正在銷售的產品：兔γ干擾素(IFN-γ)試劑盒Anti-CASP3 Antibody蛋白質磷酸酶-2A抗體
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兔甲狀腺激球蛋

公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！

產品分類：細胞培養(yǎng)

儲存條件  4℃,6個月

用途  聚乙二醇誘導細胞融合，可用作融合劑,以獲得單克隆抗體的雜交瘤細胞,誘導細胞雜交

注意事項  無菌溶液,由DPBS(pH7.4)和PEG1000或稱聚乙二醇1000組成,經無菌處理。體外培養(yǎng)的單層貼壁細胞或懸浮細胞均可以做融合，但成功概率較大的是單層貼壁細胞。

 

 

配制與標定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內穩(wěn)定可靠。

opiorphin(opiorphin)opiorphin ELISA KitBTBD6蛋白抗體包裝5g

N-乙酰基-絲酰-天門冬酰-賴酰-脯(AcSDKP)AcSDKP ELISA KitBMP內皮調節(jié)蛋白抗體包裝25g

N-乙酰-β-D-基葡萄糖苷(NAG)NAG ELISA Kit肝病NS5A反轉錄蛋白8抗體包裝5g

N端前腦鈉(NT-proBNP)NT-proBNP ELISA Kit骨形態(tài)發(fā)生蛋白1/膠原C蛋白肽鏈內切抗體包裝1g

NANOG同源域蛋白(NANOG)NANOG ELISA Kit骨形態(tài)發(fā)生蛋白9抗體包裝5g

NAD依賴性蛋白脫乙酰sirtuin-1(SIRT1)SIRT1 ELISA Kit微管蛋白β輔助因子D抗體包裝25g

NADPH氧化1(NOX1)NOX1 ELISA Kit鈣粘蛋白相關蛋白受體BTR1抗體包裝5g

M型肌激(CKM)CKM ELISA Kit有絲分裂蛋白BUB3抗體包裝1g

MAP激活化蛋白激2(MAPKAPK2)MAPKAPK2 ELISA Kitp60TRP蛋白抗體包裝5g

L選擇(L-Selectin/CD62L)L-Selectin/CD62L ELISA Kit博萊霉解抗體包裝1g

L-乳脫氫A鏈(LDH-A)LDH-A ELISA Kit短蛋白聚糖抗體包裝5g

L解(PAL)PAL ELISA KitBTB/POZ結構域蛋白3抗體包裝10MG

Klotho(Klotho)Klotho ELISA Kit巴爾得-別德爾綜合征相關蛋白12抗體包裝100g

KI-67抗原(MKI67)MKI67 ELISA Kit堿性亮鏈蛋白BZW1抗體包裝25g

I型膠原蛋白(COL-1)COL-1 ELISA Kit骨形態(tài)發(fā)生蛋白受體1B抗體包裝5g

ASH1蛋白抗體肝核因子1β(HNF1β)CWHM-12是αV整聯蛋白的有效抑制劑，抑制αvβ8，αvβ3，αvβ6和αvβ1的 IC50 值分別為0.2，0.8，1.5，1.8 nM。
PEG1000溶液EAAT2/FITC  熒光標記抗膠質谷氨運載蛋白2IgG三 GR,99.5%

EAAT3/FITC  熒光標記抗膠質谷氨運載蛋白3IgG三 用于氨分析, ≥99.5% (GC)

EAG1/FITC   熒光標記離子通道蛋白EAG1IgG三 LC-MS淋洗劑, ≥99.5% (GC)

EBNA-3/FITC  熒光標記EB病核抗原-3IgG(R)-(-)-3--1,2- 97%

E-cadherin/FITC  熒光標記E-鈣粘附分子IgG(S)-(+)-3--1,2-  97%

ECE1/FITC  熒光標記內皮轉化1IgG(±)-環(huán)氧 96%

ECE2/FITC  熒光標記抗內皮轉化2IgG氨比林 CP

ECG2/FITC  熒光標記食道癌相關因IgG土霉  97%

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉株的工作濃度需要根據細胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。

2）  根據細胞類型，設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數（通常是7-10天）內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩(wěn)定轉染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉染細胞的篩選

1）  轉染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。