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上海慧穎生物科技有限公司

RAW264.7 小鼠單核細胞-巨噬胞培養(yǎng)方法

時間:2014-4-17閱讀:2208

細胞株 細胞系  RAW264.7細胞  ATCC細胞 RAW264.7細胞培養(yǎng)

細胞名稱

RAW264.7 小鼠單核細胞-巨噬胞

種屬

小鼠

組織來源

血液

生長狀態(tài)

貼壁生長

培養(yǎng)條件

培養(yǎng)基類型:DMEM培養(yǎng)基 90%

FBS: 10% 小牛血清

抗生素:雙抗

培養(yǎng)條件:37℃,CO2: 5%

傳代方法

收到細胞后,在倒置顯微鏡下觀察細胞生長狀態(tài):

如果沒長滿,將培養(yǎng)瓶用75%酒精消毒后在超凈臺內(nèi)更換新鮮培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)。

如果細胞已經(jīng)長滿(約80%-90%)則傳代后繼續(xù)培養(yǎng)。

傳代方法:

1 棄去培養(yǎng)基,用不含鈣、鎂離子的PBS洗1-2次。

2 加1ml 0.25%的胰酶(含0.02%EDTA),讓胰酶與大部分細胞接觸后放入37℃培養(yǎng)箱內(nèi),隨時觀察細胞狀態(tài)變化,待細胞大部分變圓后加*培養(yǎng)基終止消化。

3 一般沒有特殊說明,細胞一般是一傳二。

凍存方法

70% *培養(yǎng)基,20%FBS,10%DMSO,先用現(xiàn)配。

儲存:液氮中長期保存。

1 觀察細胞在低倍鏡下觀察,便于整體估計細胞密度。

2 在運輸過程中可能會導致一些貼壁不牢的細胞發(fā)生部分脫落,可離心吹打后重新種入瓶中培養(yǎng)。

3 收到細胞后若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、細胞污染等,請于一周內(nèi)與我們。

 

來源:慧穎細胞庫

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:王

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