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DC2.4 小鼠樹(shù)突狀細(xì)胞的培養(yǎng)

時(shí)間:2014-10-24閱讀:1684

DC2.4 小鼠樹(shù)突狀細(xì)胞 培養(yǎng)詳細(xì)說(shuō)明:

培養(yǎng)條件:

        培養(yǎng)基類(lèi)型:RPMI-1640

        FBS: 10%

        抗生素:雙抗

        培養(yǎng)條件:37℃,CO2: 5%

收到細(xì)胞后,在倒置顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài):如果沒(méi)長(zhǎng)滿(mǎn),將培養(yǎng)瓶用75%酒精消毒后在超凈臺(tái)內(nèi)更換新鮮培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)。如果細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿(mǎn)(約80%-90%)則傳代后繼續(xù)培養(yǎng)。

傳代方法:

棄去培養(yǎng)基,用不含鈣、鎂離子的PBS 1-2 次。

1ml 0.25%的胰酶(含0.02%EDTA),讓胰酶與大部分細(xì)胞接觸后放入37℃培養(yǎng)箱內(nèi),隨時(shí)觀(guān)察細(xì)胞狀態(tài)變化,待細(xì)胞大部分變圓后加*培養(yǎng)基終止消化。

一般沒(méi)有特殊說(shuō)明,細(xì)胞一般是一傳二。

凍存方法:70% *培養(yǎng)基,20%FBS10%DMSO,先用現(xiàn)配。

          儲(chǔ)存:液氮中長(zhǎng)期保存。

注:

觀(guān)察細(xì)胞在低倍鏡下觀(guān)察,便于整體估計(jì)細(xì)胞密度。

在運(yùn)輸過(guò)程中可能會(huì)導(dǎo)致一些貼壁不牢的細(xì)胞發(fā)生部分脫落,可離心吹打后重新種入瓶中培養(yǎng)。

收到細(xì)胞后若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、細(xì)胞污染等,請(qǐng)及時(shí)拍照存檔,于一周內(nèi)與我們。

 

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