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上?;鄯f生物科技有限公司

常用菌種管理和保藏方法

時(shí)間:2012-8-21閱讀:3675

菌種需有專人保管,管理人員應(yīng)具有較強(qiáng)的責(zé)任心,并具有一定的微生物專業(yè)知識(shí)和技術(shù)水平。

菌種應(yīng)保存在冰箱內(nèi),保存菌種的冰箱不得放置食品及易揮發(fā)性藥品。

按期有專人根據(jù)操作規(guī)程進(jìn)行傳代接種。

 

保存菌種應(yīng)定期檢查,一般每年檢查1—2次,發(fā)現(xiàn)染菌變異等現(xiàn)象時(shí),報(bào)告科室主任研究處理。

菌種的來(lái)源、復(fù)壯、使用和鑒定等均應(yīng)做好詳細(xì)記錄。

試驗(yàn)菌種不得任意帶出菌種保存實(shí)驗(yàn)室。外單位索取菌種時(shí),應(yīng)包裝嚴(yán)密,妥善保存。

 

菌種檢查和復(fù)壯

    經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期保藏和傳代的菌種,由于種種原因易發(fā)生衰退、變異或死亡,因此各類菌種在保藏期間必須定期檢查,發(fā)現(xiàn)變異或衰退,應(yīng)及時(shí)給予恢復(fù)。

1.定期檢查

在一定間隔時(shí)間需重新復(fù)活、分離、純化、鑒定再保藏。

檢查項(xiàng)目:菌落形態(tài)、革蘭染色、顯微鏡下菌體形態(tài)、生化特性及血清學(xué)檢查。

2. 防止菌落的衰退

 

控制傳代次數(shù)。

創(chuàng)造適宜的培養(yǎng)條件。

用不同類型的細(xì)胞進(jìn)行傳代。

采用有效的保藏方法。

 

菌種的傳代

將微生物接種至一新鮮培養(yǎng)基上/內(nèi),每萌發(fā)一次即為一代——USP

菌種的傳代次數(shù)(自原始的菌種凍干粉起)不得超過(guò)5代——GMP/CP2005

 

菌種保藏

菌種保藏方法一般分四個(gè)階段

(1)挑選特征典型的純菌菌落

(2)能產(chǎn)生孢子或芽孢的微生物應(yīng)用孢子或芽孢進(jìn)行保存

(3)選擇zui適宜的方法保藏

(4)定期對(duì)保藏菌種進(jìn)行檢查

 

常用的保藏方法

瓊脂斜面低溫保藏法

液體石蠟覆蓋保藏法

半固體瓊脂保藏法

甘油冷凍管保藏法

保藏芽孢液

 

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