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陰陽(yáng)離子交換色譜柱的色譜行為
陰陽(yáng)離子交換色譜柱的色譜行為
磺酸基陽(yáng)離子交換固定相是一種常見的陽(yáng)離子交換固定相，離子交換功能基為苯磺酸，通常將其健合在有機(jī)聚合物基質(zhì)（如苯乙烯-乙基乙烯苯）或硅膠基質(zhì)上，前者耐酸堿，常用于離子色譜法分析無(wú)機(jī)陽(yáng)離子，后者機(jī)械性強(qiáng)，常用于普通HPLC分析有機(jī)化合物陽(yáng)離子。
以硅膠為基質(zhì)的磺酸基陽(yáng)離子交換固定相簡(jiǎn)稱為SCX,功能基團(tuán)為大多為苯磺酸。目前市面上有多種品牌，pH適用范圍一般為2~8，磺酸基均以離子型存在，為強(qiáng)陰陽(yáng)離子交換色譜柱。本文主要探討組分在SCX柱上的保留行為。
基于疏水作用的色譜行為
SCX固定相除磺酸基陽(yáng)離子交換位點(diǎn)外，還有苯基這一疏水作用位點(diǎn)，其保留作用類似于苯基固定相，主要是疏水作用和與含雙鍵組分的π-π相互作用。
甲苯在SCX柱上的保留行為。甲苯作為一種電中性的強(qiáng)疏水性化合物，與固定相之間不存在離子交換作用，也不存在與極性磺酸基團(tuán)間的親水相互作用，甲苯的保留，可以視為與固定相上苯基相互作用的結(jié)果，其保留隨著流動(dòng)相中有機(jī)相比例增大而減小，也與疏水作用色譜原理吻合。
對(duì)于疏水性強(qiáng)的陽(yáng)離子化合物，該疏水作用會(huì)成為組分保留的一種重要的方式之一，有時(shí)這種作用甚至?xí)?qiáng)于離子交換作用。
陰陽(yáng)離子交換色譜柱既有聚合物基質(zhì)色譜柱也有硅膠基質(zhì)色譜柱。然而，不像在反相的領(lǐng)域硅膠柱占絕大部分占有率，離子交換模式中聚合物色譜柱和硅膠色譜柱使用頻率相近。陰陽(yáng)離子交換色譜柱在蛋白質(zhì)，核酸等生物化學(xué)領(lǐng)域被廣泛利用。絕大多數(shù)重組蛋白純化都要用到離子交換。離子交換色譜的基礎(chǔ)是高分辨率，可以直接放大規(guī)模應(yīng)用在工業(yè)上，柱再生容易，還可以使蛋白濃縮。