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技術(shù)文章
測(cè)序常見問(wèn)題及其分析
點(diǎn)擊次數(shù):1246 發(fā)布時(shí)間:2016-4-26
1、PCR 產(chǎn)物測(cè)序時(shí)出現(xiàn)重疊峰
問(wèn)題圖1(模板中有堿基缺失,往往是單一位點(diǎn)(1-1)或兩個(gè)位點(diǎn)(1-2)堿基缺失導(dǎo)致測(cè)序
結(jié)果移碼)
圖1-1
解決方法:將PCR 產(chǎn)物克隆到質(zhì)粒(如T 載體)中挑單克隆測(cè)序,或?qū)CR 產(chǎn)物進(jìn)行page
純化(至少瓊脂糖充分電泳后切膠純化)后再進(jìn)行測(cè)序。
問(wèn)題圖2(PCR 產(chǎn)物不純,含部分序列一致的兩種以上的片段,長(zhǎng)度不一)
圖2