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士鋒生物克隆/建庫/表達超級感受態(tài)細胞
最近更新時間：2013-9-28
提 供 商：上海士鋒生物科技有限公司資料大?。?/span>37KB
文件類型：JPG 圖片下載次數(shù)：61次
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--克隆大DNA：包括表達質粒，基因組DNA克隆
--構建質粒文庫：減少DNA大小偏倚性，使全長cDNA克隆、雙雜交質粒等各種大小的質粒轉化效率更接近，提高文庫代表性（比DH10B高25倍）。
Hte 基因型
Hte（轉化）基因型是Stratagene開發(fā)的特異性提高大質粒、連接DNA的宿主菌基因型，并使細胞生長加快（當天獲得菌落），已經成功應用于25kb超螺旋DNA和8kb連接DNA的克隆。XL10-Gold®，BL21-Gold，BL21-CodonPlus®，SoloPack® Gold 和96Pack® Gold等系列細胞都帶有這個新的性狀。
超級感受態(tài)細胞
Stratagene提供多種>5 x 109 轉化子/μg 超螺旋DNA轉化效率的化學法超級感受態(tài)細胞正是克隆獲得大質粒、連接DNA克隆和建庫時zui值得推薦的。
電轉化感受態(tài)細胞
Stratagene的電轉化感受態(tài)細胞特別耐受電擊處理，方便好用，在DNA材料極珍貴、量少時，或構建有代表性文庫時，建議采用電轉化感受態(tài)細胞。ElectroTen-Blue®細胞是目前商品化的電轉化感受態(tài)細胞中效率zui高的，達到>3 x 1010 轉化子/μg 超螺旋DNA。此外XL1-Blue，XL1-Blue MRF’，SURE®，ABLE® 和TG1等細 胞也提供電轉化形式感受態(tài)細胞。
SURE®－克隆不穩(wěn)定DNA
大腸桿菌DNA修復系統(tǒng)會針對重復序列、二級結構（如Z-DNA）等真核DNA進行重排或刪除修飾。SURE感受態(tài)細胞針對uvrC,umuC,SbcC和RecJ等參與修飾的大腸桿菌基因或蛋白進行突變，提高了真核來源、不規(guī)則DNA的穩(wěn)定性達20倍以上，并且適合克隆甲基化DNA。提供化學和電轉化感受態(tài)細胞，效率分別達1x1010 和1x109。
ABLE®－克隆毒性DNA
目的DNA的蛋白產物常常對細胞產生毒性，通常的解決辦法是采用低拷貝質粒，或者采用極為嚴緊的表達調控。為了獲得穩(wěn)定的克隆，ABLE細胞減少ColE來源質粒的拷貝數(shù)（如pUC、pBluescript系列載體），以達到保持相對較高拷貝數(shù)的同時使本底表達對于細胞的毒性降至zui低的效果。
MR系列®－克隆甲基化DNA
真核基因組DNA常常因高度甲基化而被大腸桿菌修飾系統(tǒng)切割、刪除，在構建文庫時，由于要對cDNA進行甲基化保護，某些cDNA克隆也較難完成。采用Stratagene的MR （Minus Restriction）突變刪除了修飾系統(tǒng)的感受態(tài)細胞，可以構建質量非常高的cDNA和基因組文庫。這些細胞包括：用于大質?？寺〉腦L10-Gold®超級感受態(tài)細胞，克隆連接DNA、轉化效率 目前zui高的ElectroTen-Blue®電轉化感受態(tài)細胞，單次反應包裝的SoloPack® Gold，以及XL2-Blue MRF´ ，XL1-Blue MRF´ Kan（四環(huán)素抗性質粒），XL1-Blue MR（沒有F´附加體），克隆有二級結構的SURE細胞等。