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核磁共振的原理
最近更新時間:2017-9-20
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簡單的說就是,處于一個靜磁場中的核子(質(zhì)子和中子),會由于磁場的作用而處于不同的能量狀態(tài),當一個外界的擺動的磁場來擾動處于“平衡”狀態(tài)的核子時,吸收了能量的核子就會從不同的能級之間要遷,并再此過程中會釋放出能量。而放出的能量被檢測到之后,經(jīng)過分析和計算就可以得到蛋白質(zhì)內(nèi)部的原子的結(jié)構(gòu)信息。
進一步解釋一下:首先不是所有的原子都是有NMR現(xiàn)象的,也不是具有了NMR現(xiàn)象就可以用于蛋白結(jié)構(gòu)解析。象O16,C12是沒有核磁共振現(xiàn)象的(偶數(shù)的質(zhì)子中子和偶數(shù)的電子),象H2,N14,NMR很難分析也很少研究。只有C13,N15,H1才真正的被用于研究,并用于結(jié)構(gòu)解析。所以小一點的蛋白(小于10kd)因為含有足夠的H,可以直接用來NMR分析,而更大的蛋白則需要同位素標記,就是在M9培養(yǎng)中,加入C13的葡萄糖,N15的NH4cl,然后誘導(dǎo),從而是表達出來的蛋白中的原子都是具有NMR的C13,N15,H1。
NMR所用到的靜磁場,是磁場非常強大的靜磁場。例如750MHz的譜儀,它的靜磁場是17.5T(特斯拉),這么強的磁場是通過電磁場產(chǎn)生的,我們知道螺旋線圈是可以產(chǎn)生磁場的,NMR所用的就是處于超導(dǎo)狀態(tài)下的螺旋線圈中的電流產(chǎn)生的磁場,為了是線圈是超導(dǎo),所用要將線圈放在液氦中,使溫度接近零度。所以NMR要消耗大量的液氦,還有液氮(放在液氦外面)。
所以NMR是很昂貴的試驗,*是樣品需要同位素標記,第二是儀器非常貴重。