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甲基綠-派洛寧染色液 操作指導(dǎo)
最近更新時間：2016-6-1
提 供 商：北京諾博萊德科技有限公司資料大?。?/span>7.5KB
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產(chǎn)品簡介：
甲基綠-派洛寧染色液(Methyl Green-Pyronin Stain，MGP)甲基綠-派洛寧染色液是一種把細胞核染成綠色或藍綠色，把細胞漿和細胞核中的核仁染成紅色或紅紫色的染色液。甲基綠又稱雙綠SF，屬于堿性染料，是具有金屬光澤的綠色微結(jié)晶或粉末，分子量為608.78，分子式為C27H35Cl4N3Zn。甲基綠和細胞核中的DNA結(jié)合，從而使細胞核染成綠色或藍綠色，派洛寧可以和細胞漿或核仁中的RNA結(jié)合，從而使細胞漿和核仁染成紅色或紅紫色。
NobleRyder甲基綠-派洛寧染色液經(jīng)過改良，不含甲醇，在組織或細胞染色中對細胞核進行染色，其中的甲基綠經(jīng)過提純，更容易著色。本染色液也可以和免疫熒光染色或免疫組化染色配合使用。10ml染色液可以染色20個樣本。
產(chǎn)品組成：
編號 名稱 | D6601 | D6601 | Storage |
50ml | 100ml | RT避光 | |
使用說明書 | 1份 | ||
自備材料：
1、系列乙醇、蒸餾水
2、濾紙、RNase(可選)
3、丁三醇或丙酮或正戊醇
4、4%多聚甲醛
操作步驟(僅供參考)：
(一)石蠟切片染色
1、組織入Carnoy固定液或10%中性福爾馬林，固定3～5h。
2、切片5μm，常規(guī)脫蠟至水，蒸餾水稍洗。
3、入Methyl Green-Pyronin Stain，室溫浸染30～60min。
4、取出切片，用濾紙稍微吸干切片周圍染色液。
5、用丁三醇(也可用丙酮或正戊醇)沖洗3次，每次2～3min。
6、二甲苯透明，中性樹膠封固。
(二)冰凍切片染色
1、蒸餾水沖洗2min。
2、切片入Methyl Green-Pyronin Stain，室溫浸染25～50min。
3、用蒸餾水沖洗2次，此時樣本呈藍色。
4、余下步驟同石蠟切片染色。
(三)細胞染色
1、用4%多聚甲醛固定10min以上。
2、蒸餾水洗滌2min。
3、換用新鮮的蒸餾水，再洗滌2min。
4、用Methyl Green-Pyronin Stain染色5～10min。
5、顯微鏡下觀察。
(四)熒光染色
1、如果進行免疫熒光染色，在染色后應(yīng)用70％乙醇洗滌2次，每次2min。
2、95%乙醇脫水2min。
3、PBS或鹽水或TBS等用于免疫染色或熒光染料染色的溶液浸泡5min。
4、進行免疫熒光染色或其它熒光染料的染色。
染色結(jié)果：
細胞核(DNA) | 綠色或藍綠色 |
細胞漿和核仁（RNA） | 紅色或紅紫色 |
陰性對照：
1、取另外一張連續(xù)切片入RNase(1mg/ml)，37℃恒溫箱內(nèi)孵育3h，蒸餾水沖洗干凈。
2、入Methyl Green-Pyronin Stain染色，余下步驟同上。RNA染色結(jié)果為陰性。
注意事項：
1、使用染色液時建議先取1~2個樣品做預(yù)實驗。
2、Methyl Green-Pyronin Stain染色可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時間。
3、有些粘液細胞有可能被派洛寧染成紅色，應(yīng)注意區(qū)分。
有效期：12個月有效。
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