北京熒光顯微鏡的原理和結(jié)構(gòu)類型

北京熒光顯微鏡的原理和結(jié)構(gòu)類型

*：徠卡熒光顯微鏡DM500/DM750/DM1000/DM2000熒光顯微鏡

第二：尼康熒光顯微鏡E100/E200/50I/80I/CI/NI

第三：奧林巴斯熒光顯微鏡CX22/CX31/CX41/BX43/BX53/

第四：蔡司熒光顯微鏡

熒光顯微鏡原理；

     熒光顯微鏡 通常是利用一個(gè)高發(fā)光效率的點(diǎn)光源，并經(jīng)過(guò)濾色系統(tǒng)發(fā)出一定波長(zhǎng)的光作為激發(fā)光、激發(fā)標(biāo)本內(nèi)的熒光物質(zhì)發(fā)射出各種顏色的熒光后，然后再通過(guò)物鏡和目鏡進(jìn)行放大，以便更好地進(jìn)行觀察。同時(shí)在強(qiáng)烈的對(duì)襯背景下，即使熒光很微弱也很容易辨認(rèn)，且敏感性較高，主要可用于細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能及化學(xué)成分等的研究。 
     

熒光顯微鏡的基本構(gòu)造通常由普通光學(xué)顯微鏡再加一些如熒光光源 、激發(fā)濾片、雙色束分離器及阻斷濾片等附件的基礎(chǔ)上組成。同時(shí)采用的熒光光源一般為超高壓汞燈，它可發(fā)出各種波長(zhǎng)的光，且每種熒光物質(zhì)都會(huì)有一個(gè)產(chǎn)生強(qiáng)熒光的激發(fā)光波長(zhǎng) ，這時(shí)需加置激發(fā)濾片，通常有紫外、紫色、藍(lán)色及綠色激發(fā)濾片，僅需使一定波長(zhǎng)的激發(fā)光透過(guò)并照射到標(biāo)本上，并將其他光都吸收掉。同時(shí)在每種物質(zhì)被激發(fā)光照射后，更可在極短時(shí)間內(nèi)發(fā)射出比照射波長(zhǎng)更長(zhǎng)的可見(jiàn)熒光。 
 

      需要注意的是，熒光通常具有專一性，一般都較激發(fā)光弱，且為了能觀察到更專一的熒光，并在物鏡后面需加阻斷或壓制濾光片。其作用是：一是吸收或阻擋激發(fā)光進(jìn)入目鏡、以更好的避免干擾熒光或損傷到眼睛，二是可選擇并使特異的熒光透過(guò)，更能表現(xiàn)出專一的熒光色彩。同時(shí)注意，兩種濾光片須選擇配合使用。 
透射式熒光顯微鏡:  
 激發(fā)光源常會(huì)通過(guò)聚光鏡穿過(guò)標(biāo)本材料來(lái)激發(fā)熒光。常用的有暗視野集光器，更可用普通集光器，同時(shí)可調(diào)節(jié)反光鏡并使激發(fā)光轉(zhuǎn)射和旁射到標(biāo)本上。其優(yōu)點(diǎn)為低倍鏡時(shí)熒光強(qiáng)，而缺點(diǎn)就是隨放大倍數(shù)的增加而令熒光減弱，所以對(duì)于觀察較大的標(biāo)本材料來(lái)說(shuō)是較好的。 
落射式熒光顯微鏡： 
 

      落射式熒光顯微鏡是近代發(fā)展較快的新式熒光顯微鏡，較為不同的是激發(fā)光從物鏡向下落射標(biāo)本表面，并可用同一物鏡作為照明聚光器和收集熒光的物鏡。同時(shí)光路中需加上一個(gè)雙色束分離器，一般他與光鈾呈45°角，激發(fā)光被反射到物鏡中，并聚集到樣品上，且樣品所產(chǎn)生的熒光及由物鏡透鏡表面、蓋玻片表面反射的激發(fā)光會(huì)同時(shí)進(jìn)入物鏡，反射回到雙色束分離器，并使激發(fā)光和熒光分開，且殘余的激發(fā)光會(huì)再被阻斷濾片吸收?？蓳Q用不同的激發(fā)濾片、雙色束分離器及阻斷濾片的組合插塊，更可滿足不同熒光反應(yīng)產(chǎn)物的需要。這種熒光顯微鏡的優(yōu)點(diǎn)就是視野照明較為均勻，且成像清晰，通常放大倍數(shù)越大熒光會(huì)越強(qiáng)。