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關(guān)于細胞株你都了解嗎?

閱讀:2057發(fā)布時間:2020-12-10

  細胞株通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的培養(yǎng)物稱為細胞株,是用單細胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法,由單細胞增殖形成的細胞群。細胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個培養(yǎng)期間始終存在。特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個培養(yǎng)期間始終存在。對于人類腫瘤細胞,在體外培養(yǎng)半年以上,生長穩(wěn)定,并連續(xù)傳代的即可稱為連續(xù)性株或系。細胞株的建立實驗是通過細胞與低劑量的藥物長期接觸,引起細胞本身生物化學(xué)過程的改變,細胞膜上出現(xiàn)Pgp(或P-170)糖蛋白,使細胞逐漸對藥物耐受。
 
  細胞株的培養(yǎng)小技巧:
 
  1. 買細胞要去靠譜的地方買,比如 ATCC 或者然泰生物。一般上面會有針對細胞的介紹,這樣培養(yǎng)之前可以了解細胞正常生長的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等。
 
  2. 不管是買的細胞,還是別人惠贈的細胞,剛拿到手趕緊的做兩件事:檢測是否有支原體污染;迅速擴增凍存,凍存細胞復(fù)蘇后更換一次培養(yǎng)基。
 
  3. 發(fā)現(xiàn)細胞有污染迅速處理掉,特別是當(dāng)你養(yǎng)了很多種細胞時。細菌污染、真菌污染很容易發(fā)現(xiàn),支原體污染的話,細胞會長的慢,可以買個支原體檢測的試劑盒定期檢測一下。
 
  4. 不同細胞生長周期不同。有的生長很快,比如說 MDA-MB-231,傳代的時候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了。有的又是特別慢,比如 BT474,傳代是一分二,復(fù)蘇起始的時候兩周多才能長滿。這就需要要在培養(yǎng)細胞的過程中多多摸索。
 
  5. 對于嬌弱的細胞,就得細心呵護。胰酶消化不能過久,吹得時候要輕柔,離心時候也要注意轉(zhuǎn)速和時間。每天都要去看一下細胞,肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細胞生長狀況。

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