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滅菌器使用和效果判斷
閱讀：2185發(fā)布時(shí)間：2015-7-23
滅菌器如何使用：首先在外層鍋內(nèi)加適量的水，將需要滅菌的物品放入內(nèi)層鍋，蓋好鍋蓋并對(duì)稱地扭緊螺旋。然后加熱使鍋內(nèi)產(chǎn)生蒸氣，當(dāng)壓力表指針達(dá)到 33.78kPa時(shí)，打開(kāi)排氣閥，將冷空氣排出，此時(shí)壓力表指針下降，當(dāng)指針下降至零時(shí)，即將排氣閥關(guān)好。zui后繼續(xù)加熱，鍋內(nèi)蒸氣增加，壓力表指針又上升，當(dāng)鍋內(nèi)壓力增加到所需壓力時(shí)，將火力減小，按所滅菌物品的特點(diǎn)，使蒸氣壓力維持所需壓力一定時(shí)間，然后將滅菌器斷電或斷火，讓其自然冷后再慢慢打開(kāi)排氣閥以排除余氣，然后才能開(kāi)蓋取物 。
滅菌器林林總總，質(zhì)量參差不齊。國(guó)內(nèi)售賣的滅菌器，往往儀器指針達(dá)到所需的溫度，但滅菌物品的實(shí)際溫度卻未達(dá)到要求。導(dǎo)致滅菌物品不*，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。尤其是對(duì)無(wú)菌試驗(yàn)培養(yǎng)基滅菌不*，直接關(guān)系到對(duì)藥品無(wú)菌試驗(yàn)結(jié)果的判斷。使物品在滅菌后達(dá)到無(wú)菌要求，這是藥品實(shí)驗(yàn)中的一個(gè)基本保證，也是滅菌器效果是否合格是實(shí)驗(yàn)成敗的zui基礎(chǔ)zui關(guān)鍵的首要步驟。現(xiàn)在我們就為您介紹簡(jiǎn)易的滅菌效果驗(yàn)證的方法。
1.試驗(yàn)材料
① 嗜熱芽孢桿菌紙片；噬熱芽孢桿菌ATCC7053，含芽孢量5—105CFU/片
② 121℃壓力蒸汽滅菌化學(xué)指示卡；溴甲酚紫胨水培養(yǎng)基，116℃20分鐘高壓滅菌后備用。
③ 0—150℃留點(diǎn)溫度計(jì)
2.方法與結(jié)果
將嗜熱芽孢桿菌紙片用無(wú)菌鑷子放人密封試管中。化學(xué)指示卡和留點(diǎn)溫度計(jì)放人敞口的試管中。上兩種試管各準(zhǔn)備5—10份。分別放置在滅菌器蒸汽口處、底部排氣口處及底部水口處或上下左右中間5處。如壓力蒸汽滅菌器為二層，則需放10處。留點(diǎn)溫度計(jì)標(biāo)化合格后可用于驗(yàn)證試驗(yàn)。檢測(cè)前，需將溫度計(jì)的水銀柱甩至40℃以下。每次監(jiān)測(cè)后留點(diǎn)溫度計(jì)的溫差應(yīng)在1℃之間，則說(shuō)明滅菌器內(nèi)的溫度分布是均勻的。滅菌后的菌片應(yīng)在嚴(yán)格無(wú)菌操作條件下放人滅菌后的溴甲酚紫胨水培養(yǎng)基內(nèi)。56—60℃培養(yǎng)24-48小時(shí)，觀察顏色變化。如培養(yǎng)基變?yōu)辄S色，說(shuō)明菌片中的嗜熱芽孢桿菌尚未*滅活，細(xì)菌仍可在培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，分解葡萄糖產(chǎn)酸變?yōu)辄S色。如培養(yǎng)基顏色不變化仍為紫色，則說(shuō)明芽孢菌已滅活。同時(shí)要用未經(jīng)滅菌的紙片放人培養(yǎng)基內(nèi)作為陽(yáng)性對(duì)照，不加紙片的空白培養(yǎng)基作為陰性對(duì)照?；瘜W(xué)指示卡上的指示色塊，在滅菌器滅菌時(shí)，由淡黃色變?yōu)楹谏ｋS著顏色變化的深淺，并與對(duì)照色相比，可判斷滅菌效果是否達(dá)到要求。化學(xué)指示卡應(yīng)在干燥處保存。遇潮會(huì)變色，影響滅菌效果的觀測(cè)。滅菌器必須使蒸汽順利進(jìn)入滅菌器內(nèi)，與滅菌物品接觸，并將原有的冷空氣排出方可達(dá)到滅菌的效果。要進(jìn)行空載熱分布和滿載熱穿透力驗(yàn)證(滿載時(shí)不超過(guò)總體積的2／3)。二種驗(yàn)證各重復(fù)三次，共做六次表。5個(gè)點(diǎn)六次試驗(yàn)表明溫度均在121 ℃，化學(xué)指示卡變黑；程度與對(duì)照色一致；培養(yǎng)基均未改變顏色，說(shuō)明滅菌器效果合格。
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