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滅菌器使用和效果判斷
閱讀：2177發(fā)布時間：2015-7-23
滅菌器如何使用：首先在外層鍋內(nèi)加適量的水，將需要滅菌的物品放入內(nèi)層鍋，蓋好鍋蓋并對稱地扭緊螺旋。然后加熱使鍋內(nèi)產(chǎn)生蒸氣，當壓力表指針達到 33.78kPa時，打開排氣閥，將冷空氣排出，此時壓力表指針下降，當指針下降至零時，即將排氣閥關好。zui后繼續(xù)加熱，鍋內(nèi)蒸氣增加，壓力表指針又上升，當鍋內(nèi)壓力增加到所需壓力時，將火力減小，按所滅菌物品的特點，使蒸氣壓力維持所需壓力一定時間，然后將滅菌器斷電或斷火，讓其自然冷后再慢慢打開排氣閥以排除余氣，然后才能開蓋取物 。
滅菌器林林總總，質(zhì)量參差不齊。國內(nèi)售賣的滅菌器，往往儀器指針達到所需的溫度，但滅菌物品的實際溫度卻未達到要求。導致滅菌物品不*，影響實驗結(jié)果。尤其是對無菌試驗培養(yǎng)基滅菌不*，直接關系到對藥品無菌試驗結(jié)果的判斷。使物品在滅菌后達到無菌要求，這是藥品實驗中的一個基本保證，也是滅菌器效果是否合格是實驗成敗的zui基礎zui關鍵的首要步驟。現(xiàn)在我們就為您介紹簡易的滅菌效果驗證的方法。
1.試驗材料
① 嗜熱芽孢桿菌紙片；噬熱芽孢桿菌ATCC7053，含芽孢量5—105CFU/片
② 121℃壓力蒸汽滅菌化學指示卡；溴甲酚紫胨水培養(yǎng)基，116℃20分鐘高壓滅菌后備用。
③ 0—150℃留點溫度計
2.方法與結(jié)果
將嗜熱芽孢桿菌紙片用無菌鑷子放人密封試管中?；瘜W指示卡和留點溫度計放人敞口的試管中。上兩種試管各準備5—10份。分別放置在滅菌器蒸汽口處、底部排氣口處及底部水口處或上下左右中間5處。如壓力蒸汽滅菌器為二層，則需放10處。留點溫度計標化合格后可用于驗證試驗。檢測前，需將溫度計的水銀柱甩至40℃以下。每次監(jiān)測后留點溫度計的溫差應在1℃之間，則說明滅菌器內(nèi)的溫度分布是均勻的。滅菌后的菌片應在嚴格無菌操作條件下放人滅菌后的溴甲酚紫胨水培養(yǎng)基內(nèi)。56—60℃培養(yǎng)24-48小時，觀察顏色變化。如培養(yǎng)基變?yōu)辄S色，說明菌片中的嗜熱芽孢桿菌尚未*滅活，細菌仍可在培養(yǎng)基中生長，分解葡萄糖產(chǎn)酸變?yōu)辄S色。如培養(yǎng)基顏色不變化仍為紫色，則說明芽孢菌已滅活。同時要用未經(jīng)滅菌的紙片放人培養(yǎng)基內(nèi)作為陽性對照，不加紙片的空白培養(yǎng)基作為陰性對照?；瘜W指示卡上的指示色塊，在滅菌器滅菌時，由淡黃色變?yōu)楹谏?。隨著顏色變化的深淺，并與對照色相比，可判斷滅菌效果是否達到要求。化學指示卡應在干燥處保存。遇潮會變色，影響滅菌效果的觀測。滅菌器必須使蒸汽順利進入滅菌器內(nèi)，與滅菌物品接觸，并將原有的冷空氣排出方可達到滅菌的效果。要進行空載熱分布和滿載熱穿透力驗證(滿載時不超過總體積的2／3)。二種驗證各重復三次，共做六次表。5個點六次試驗表明溫度均在121 ℃，化學指示卡變黑；程度與對照色一致；培養(yǎng)基均未改變顏色，說明滅菌器效果合格。
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