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如何驗證高壓滅菌鍋的滅菌方法
閱讀：6210發(fā)布時間：2015-12-23
高壓滅菌鍋的滅菌工作原理：
濕熱滅菌是物品放入密閉的加壓滅菌鍋內(nèi)加熱，產(chǎn)生蒸汽，排除冷空氣后密閉，使蒸汽不溢出，增大壓強，使水的沸點升高，高于100℃，導致菌體蛋白質(zhì)凝固變性達到目的 ,濕熱滅菌zui主要的設備就是高壓滅菌鍋。
常用高壓滅菌鍋主要有手提式高壓滅菌鍋、臺式高壓滅菌鍋、立式高壓滅菌鍋等幾種，種類不同，但使用基本相似，具體操作如下：
1、使用前應了解并掌握高壓滅菌鍋的原理及操作規(guī)則，以及不正確使用導致災難性后果，保障消毒滅菌的質(zhì)量，使用人員需經(jīng)過有關培訓。
2、所有具有傳染性的廢物都應該高壓滅菌。
3、 開始滅菌前所有物品必須貼有滅菌指示帶，廢物滅菌后可以看到滅菌是否*。
4、高壓滅菌鍋操作人員在使用高壓滅菌鍋時不得離開崗位，高壓滅菌鍋應按照規(guī)定進行安全和計量檢定，檢定合格方可投入使用，并應注意日常維護保養(yǎng)。
5、高壓滅菌鍋內(nèi)的物品不得放的過滿，否則影響滅菌效果。放好被消毒滅菌的物質(zhì)后，高壓滅菌鍋的蓋子或門盡量擰緊。
6實驗室高壓滅菌鍋由三級生物安全防護實驗室管理員定期檢查，以確保高壓滅菌鍋正常工作，防止意外事故發(fā)生，保證消毒滅菌效果。
高壓滅菌鍋使物品滅菌后達到無菌要求，這是藥品實驗中的一個基本保證。高壓滅菌鍋滅菌效果是否合格是實驗成敗的zui基礎zui關鍵的首要步驟。本文提供了進行滅菌效果驗證的一個簡易的方法。
1 試驗材料
嗜熱芽孢桿菌紙片；噬熱芽孢桿菌ATCC7053，含芽孢量5—105CFU片]121 oC壓力蒸汽滅菌化學指示卡；溴甲酚紫胨水培養(yǎng)基，116~C20分鐘高壓滅菌后備用。0—150 oC留點溫度計
2 方法與結果
將嗜熱芽孢桿菌紙片用無菌鑷子放人密封試管中?；瘜W指示卡和留點溫度計放人敞口的試管中。上兩種試管各準備5—10份。分別放置在高壓滅菌鍋蒸汽口處、底部排氣口處及底部水口處或上下左右中間5處。如滅菌器為二層，則需放10處】。留點溫度計標化合格后可用于驗證試驗。檢測前，需將溫度計的水銀柱甩至40℃以下。每次監(jiān)測后留點溫度計的溫差應在1oC之間，則說明滅菌器內(nèi)的溫度分布是均勻的。滅菌后的菌片應在嚴格無菌操作條件下放人滅菌后的溴甲酚紫胨水培養(yǎng)基內(nèi)。56—60~C培養(yǎng)2448小時，觀察顏色變化。如培養(yǎng)基變?yōu)辄S色，說明菌片中的嗜熱芽孢桿菌尚未*滅活，細菌仍可在培養(yǎng)基中生長，分解葡萄糖產(chǎn)酸變?yōu)辄S色。如培養(yǎng)基顏色不變化仍為紫色，則說明芽孢菌已滅活。同時要用未經(jīng)滅菌的紙片放人培養(yǎng)基內(nèi)作為陽性對照，不加紙片的空白培養(yǎng)基作為陰性對照。化學指示卡上的指示色塊，在高壓蒸汽滅菌時，由淡黃色變?yōu)楹谏?。隨著顏色變化的深淺，并與對照色相比，可判斷滅菌效果是否達到要求?；瘜W指示卡應在干燥處保存。遇潮會變色，影響滅菌效果的觀測。高壓蒸汽滅菌必須使蒸汽順利進入滅菌器內(nèi)，與滅菌物品接觸，并將原有的冷空氣排出方可達到滅菌的效果。要進行空載熱分布和滿載熱穿透力驗證(滿載時不超過總體積的2／3)。二種驗證各重復三次，共做六次見表。5個點六次試驗表明溫度均在121 oC，化學指示卡變黑；程度與對照色一致；培養(yǎng)基均未改變顏色，說明高壓蒸汽滅菌效果合格。
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