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滬鼎分析如何應(yīng)對(duì)ELISA抗體的正確識(shí)別能力
閱讀：592 發(fā)布時(shí)間：2014-12-25| 提 供 商 | 上海滬鼎生物科技有限公司 | 資料大小 | 68KB |
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怎樣知道抗體對(duì)蛋白質(zhì)的正確識(shí)別能力？
上海滬鼎分析：
首先用間接的ELISA分析做確認(rèn)，ELISA板上用動(dòng)物免疫反應(yīng)的蛋白質(zhì)或多肽包被，把血清加入板中孵育，隨后二抗發(fā)出信號(hào)。這是*個(gè)證據(jù)能說明免疫動(dòng)物產(chǎn)生的抗體能識(shí)別目標(biāo)蛋白或肽。
然而，這個(gè)結(jié)果可能與在自然組織中檢測(cè)到的水平不直接對(duì)應(yīng)。
ELISA試劑盒板上包被了很好的暴露的多肽或蛋白質(zhì)，在只含有少數(shù)細(xì)胞的自然組織蛋白中可能不會(huì)發(fā)生。因此，測(cè)試包括收集已知或我們猜測(cè)能正確表達(dá)目標(biāo)蛋白的材料。另外也包括以缺失或過表達(dá)突變體提取物為對(duì)照的測(cè)試。在免疫印跡中使用重組蛋白作為對(duì)照，可能會(huì)為我們提供一些信息，但在某些情況下， 產(chǎn)生的抗體只識(shí)別重組蛋白而不識(shí)別天然的蛋白質(zhì)。另一個(gè)風(fēng)險(xiǎn)是，我們的膜暴露的時(shí)間太短，使得只能顯示出重組蛋白的信號(hào)?？紤]特定組織的表達(dá)水平，遵循一定的發(fā)展模式，有些蛋白質(zhì)難以檢測(cè)。為了測(cè)試的成功所有這些因素都必須考慮在內(nèi)。