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公司動態(tài)

用表格形式表達elisa競爭法操作

閱讀:1020          發(fā)布時間:2014-8-27

    每個試劑盒都包括5-6個標(biāo)準(zhǔn)品、48或96孔抗體包被微孔、48或96孔顏色標(biāo)記的稀釋孔、酶聯(lián)偶合物、底物和終止液等。今天上海滬鼎為您用表格的形式來表達elisa競爭法的操作,將陰性標(biāo)本94份并用生理鹽水進行1:30稀釋,在加入標(biāo)本后按下表時間放置后再加入酶標(biāo)抗體,然后檢測結(jié)果如下:

    從上表可以看出,假猶如時加入標(biāo)本與酶標(biāo)抗體,沒泛起假陽性現(xiàn)象。特別是在放置時間長,且溫度高的情況下,對結(jié)果有很大的影響。第二軍醫(yī)大學(xué)長海病院對此造成的影響進行了研究。因此建議競爭按捺法的項目,加十個樣本后立刻加酶標(biāo)抗體,這樣對檢測結(jié)果沒有影響。但實際工作中并非如斯,都是分開加入反應(yīng)孔。2分鐘后再加入酶標(biāo)抗體,因為標(biāo)本比酶標(biāo)抗體先結(jié)合了兩分鐘,因此泛起了7.4%的假陽性。而競爭按捺法的原理:酶標(biāo)抗體與樣本抗體在同樣的體系中,與固相抗原競爭結(jié)合是等比關(guān)系。30分鐘后再加,假陽性高達57.4%。這樣會造成先加入的先結(jié)合,與后加入者并不是公平的關(guān)系,因而也不符合等比原則。原論上講,應(yīng)該先將樣本與酶標(biāo)抗體先行混勻,然后加入反應(yīng)也進行。兩對半使用ELISA方法,其中HBsAg、HBsAb、HBeAg使用雙抗原/抗體夾心法檢測,而HBcAb、HBeAb使用競爭按捺法檢測。
    上海滬鼎試劑盒優(yōu)勢占據(jù):、結(jié)果與HPLC方法一致、高靈敏度、重現(xiàn)性好、在同一實驗室或不同實驗室之間保證結(jié)果的穩(wěn)定性。

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