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我司錢經(jīng)理為您講解怎樣處理ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果?

閱讀:714          發(fā)布時間:2015-5-21

怎樣處理ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果?
    1.ELISA實(shí)驗(yàn)中樣品都要做復(fù)孔或三孔,然后計(jì)算每個濃度標(biāo)準(zhǔn)品的平均OD值,復(fù)孔的變異系數(shù)應(yīng)該小于20%。
    2.平均OD值減去空白孔的OD值。
    3.制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。
     以減去本底后的OD值為X軸,標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為Y軸,利用作圖軟件得出一個合適的計(jì)算方法。建議使用合適的軟件來作圖,比如CurveExpert 1.4。這款軟件能夠給出很多種方法(比如直線、半對數(shù)、對數(shù)、四參數(shù)方程等)并從中選擇一條zui合適的方程。要想檢驗(yàn)?zāi)硹l曲線是否與表中數(shù)據(jù)吻合,可以將標(biāo)準(zhǔn)品的濃度作為未知數(shù),將對應(yīng)的OD值帶入該方程,計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)品的濃度,得到的結(jié)果應(yīng)該與實(shí)際濃度很接近(+/-10%)。選擇擬合度zui高的那條曲線。
  4.對于OD值落在標(biāo)準(zhǔn)曲線之外的情況
  如果樣品的OD值超過標(biāo)準(zhǔn)曲線的zui高值,在實(shí)驗(yàn)前應(yīng)該先將樣品稀釋從而得到準(zhǔn)確的濃度。樣品的zui終度應(yīng)該是計(jì)算出的濃度乘以稀釋倍數(shù)。

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