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哈靈實驗室教大家透析袋知識
閱讀：2226 發(fā)布時間：2015-6-3哈靈實驗室教大家透析袋知識
1. 透析袋原理
技術(shù)指標：MWCO（截留分子量），單位：Diatoms 。
透析時，小于MWCO的分子在透析膜二邊溶液濃度差產(chǎn)生的擴散壓作用下滲過透析膜，其速度與濃度梯度、膜面積及溫度成正比。欲快速透析可采用直徑較小的透析袋以增加膜面積。常用溫度：4℃，升溫、更換袋外透析液或用磁力攪拌器，均能提高透析速度。
2. 透析袋用途
透析即用半透膜（透析袋）將大分子蛋白質(zhì)分離出來。在生物大分子制備過程中除去鹽、少量有機溶劑、生物小分子雜質(zhì)和濃縮樣品，透析法簡便。
3. 透析袋使用方法:
① 把透析袋剪成適當長度（10cm左右）的小段。
② 取適量透析袋處理液（Fast-Tre Solution）稀釋100倍，將透析袋放于其中煮沸10分鐘。
③ 取出用蒸餾水*清洗透析袋。
④ 暫不使用的話需要將透析袋*浸泡到稀釋100倍后的透析袋儲存液（Long-Sav Solution）中，存放于4度。從此時起取用透析袋是必須戴手套。
⑤ 浸泡在透析袋儲存液中的透析袋取出使用前，須將透析袋內(nèi)裝滿水然后排出，將之清洗干凈，沖洗三次即可。
實驗要求不高的可以用簡易處理方法：在沸水中煮10min即可使用
⑥使用時，一端用下沉透析袋夾子夾緊，灌滿水后，用手指適當加壓，檢查不漏，方可裝入樣品。通常要留三分之一至一半的空間，以防透析過程中，袋外的水和緩沖液過量進入袋內(nèi)將袋漲破。裝完樣品后，用上浮夾子夾緊袋口，可在袋內(nèi)放一玻璃珠，以使透析袋處于懸浮狀態(tài)，即可進行透析。為了加快透析速度，除多次更換透析液外，還可使用磁力攪拌器。透析的容器要大一些，可以使用大燒杯、大量筒和塑料桶。
4. 透析袋相關(guān)配件
5.透析袋使用中注意事項及技巧
透析袋用之前一定要處理；
1）除鹽透析時將高鹽的樣本加入透析袋中，夾緊，用你選擇的保存液進行透析，一般在2-8度透析，中間要更換一到兩次透析液，另外透析液體積盡量大些。
先把透析液放進容器中（容器的直徑小于透析袋長度），再將夾好的透析袋豎直放進去，這樣透析袋與透析液的接觸面積是大的，幾乎整個透析袋都與透析液接觸，溶液的置換面積大，置換速度快。
如果夾子很穩(wěn)，那就夾好，先把透析液放進容器中（容器的直徑小于透析袋長度），再將夾好的透析袋豎直放進去，這樣透析袋與透析液的接觸面積是大的，幾乎整個透析袋都與透析液接觸，溶液的置換面積大，置換速度快。
假如夾子夾不穩(wěn)，那就盡量避免有夾子的一端接觸透析液，以免漏出去。把透析液放進容器中（容器的直徑小于透析袋長度），再將夾好的透析袋平放進去，這樣透析袋與透析液的接觸面積不大，大約只有一半的透析袋與透析液接觸，置換速度慢。
假如夾子不是特別不穩(wěn)，那就將透析袋兩端回折，夾子夾在回折的中間，這樣可以減小漏液的危險，再讓透析袋放在容器液面上，夾子向上（容器的直徑小于透析袋長度）。要注意定時打濕整個透析袋，不然接觸不到透析液的透析袋可能會干裂漏液。
透析袋一定不能裝滿，因為透析液的滲透壓低于透析袋內(nèi)樣品，樣品中的鹽出去的時候透析液也會進來，造成樣品的體積增大，嚴重的時候可能會脹破透析袋，在夾子不穩(wěn)時會很容易漏液。
除了*次使用，透析袋還是干的，要預(yù)處理之外，第二次就不用預(yù)處理了。透析袋用完之后要沖洗干凈，然后4度保存，要保濕不能干掉。要是干了或者生長微生物，就丟棄，免得影響實驗效果。
透析的時間不確定，但是勤攪拌（例如磁力攪拌）和勤換洗脫液會加快達到目的的速度。
2）蛋白質(zhì)吸附量，小于1ug/克，（以透析袋干重計）。
正常使用PH值5-9（可重復(fù)使用）。
極限使用PH值2-12（一次性使用）。
3）前處理：煮沸5分鐘后用蒸餾水60℃洗沖2分鐘，置4℃蒸餾水中待用。
長期保存液：0。05%-0。1%疊氮鈉，1mMEDTA或50%甘油，溫度（4℃），使用前以蒸餾水洗凈。
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