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人脂肪型脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP4)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)

閱讀:1097          發(fā)布時(shí)間:2015-11-11

人脂肪型脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP4)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)

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一、操作因素對(duì)ELISA結(jié)果的影響ELISA操作步驟復(fù)雜,操作不當(dāng)將引起較大的誤差。以下敘述各個(gè)步驟中的影響因素。
1.加樣
2.溫育
3.洗滌
4.顯色
5.比色
二、灰區(qū)的設(shè)置通常情況下,ELISA定性實(shí)驗(yàn)以“陽(yáng)性"和“陰性"來(lái)報(bào)告結(jié)果,兩者間有一條分界線被稱為“陽(yáng)性判斷值"(cut-off value,CO值),這是定性免疫測(cè)定結(jié)果報(bào)告的依據(jù)。
三、標(biāo)本復(fù)查ELISA手工檢測(cè)過(guò)程復(fù)雜,影響因素較多,即使室內(nèi)質(zhì)控在控,也可能因孔間差異而造成結(jié)果的差異,因此加大復(fù)查力度是保證結(jié)果準(zhǔn)確性的可靠方法,比如對(duì)HBsAg、HBeAg、HCV-Ab、HIV-Ab、TP-Ab等項(xiàng)目的可疑、弱陽(yáng)性標(biāo)本及少見(jiàn)模式的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行復(fù)查。
四、結(jié)果判斷和報(bào)告常用下列幾種方法表示結(jié)果:

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1.定性測(cè)定
2.半定量測(cè)定 結(jié)果一般以滴度表示。
3.定量測(cè)定 即用已知量的標(biāo)準(zhǔn)品作一系列稀釋后進(jìn)行ELISA測(cè)定,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,結(jié)果以量或單位表示。在ELISA定量檢測(cè)中每一塊反應(yīng)板都必須繪制相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
4.結(jié)果報(bào)告
五、操作步驟:用于檢測(cè)未知抗原的雙抗體夾心法
1. 包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡(jiǎn)稱洗滌,下同)。

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2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。
3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時(shí),洗滌。完整版說(shuō)明書(shū)可以向我們銷售索??!

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