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流式細(xì)胞儀的特性介紹

閱讀:1408      發(fā)布時(shí)間:2023-1-13
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  一、流式細(xì)胞儀(Flowcytometer)是對(duì)細(xì)胞進(jìn)行自動(dòng)分析和分選的裝置。它可以快速測(cè)量、存貯、顯示懸浮在液體中的分散細(xì)胞的一系列重要的生物物理、生物化學(xué)方面的特征參量,并可以根據(jù)預(yù)選的參量范圍的細(xì)胞亞群從中分選出來(lái)。
 
  二、多數(shù)流式細(xì)胞計(jì)是一種零分辨率的儀器,它只能測(cè)量一個(gè)細(xì)胞的諸如總核酸量,總蛋白量等指標(biāo),而不能鑒別和測(cè)出某一特定部位的核酸或蛋白的多少。也就是說(shuō),它的細(xì)節(jié)分辨率為零。
 
  三、流式細(xì)胞計(jì)中一般備有兩類放大器。一類是輸出信號(hào)輻度與輸入信號(hào)成線性關(guān)系,稱為線性放大器。線性放大器適用于在較小范圍內(nèi)變化的信號(hào)以及代表生物學(xué)線性過(guò)程的信號(hào),例DNA測(cè)量等。另一類是對(duì)數(shù)放大器,輸出信號(hào)和輸入信號(hào)之間成常用對(duì)數(shù)關(guān)系。在免疫學(xué)測(cè)量中常使用對(duì)數(shù)放大器。因?yàn)樵诿庖叻治鰰r(shí)常要同時(shí)顯示陰性、陽(yáng)性和強(qiáng)陽(yáng)性三個(gè)亞群,它們的熒光強(qiáng)度相差1~2個(gè)數(shù)量級(jí);而且在多色免疫熒光測(cè)量中,用對(duì)數(shù)放大器采集數(shù)據(jù)易于解釋。此外還有調(diào)節(jié)便利、細(xì)胞群體分布形狀不易受外界工作條件影響等優(yōu)點(diǎn)。
 
  四、熒光信號(hào)主要包括兩部分:①自發(fā)熒光,即不經(jīng)熒光染色,細(xì)胞內(nèi)部的熒光分子經(jīng)光照射后所發(fā)出的熒光;②特征熒光,即由細(xì)胞經(jīng)染色結(jié)合上的熒光染料受光照而發(fā)出的熒光,其熒光強(qiáng)度較弱,波長(zhǎng)也與照射激光不同。自發(fā)熒光信號(hào)為噪聲信號(hào),在多數(shù)情況下會(huì)干擾對(duì)特異熒光信號(hào)的分辨和測(cè)量。

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