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水即生命——談細(xì)胞培養(yǎng)中的超純水
本實驗的目的是為了評估Arium pro UF系統(tǒng)生產(chǎn)的超純水是否能夠安全無恙地輕松用于細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用。在本研究中，我們以即用型CDM4PERMab（Hyclone）培養(yǎng)基來培養(yǎng)PER.C6 EpCAM細(xì)胞作為對照，同時分別用Arium pro UF生產(chǎn)出來的水（UF水）和RO水來配制CDM4PERMab（Hyclone）粉末培養(yǎng)基。在本應(yīng)用指南中所使用的RO水?dāng)?shù)據(jù)是通過新一代Arium系統(tǒng)的舊款模型（Arium RO）而獲得的。每個培養(yǎng)批次的結(jié)果用于評估由Arium pro UF系統(tǒng)生產(chǎn)的水是否適合用于PER.C6 EpCAM細(xì)胞的培養(yǎng)。
本實驗中所使用的PER.C6細(xì)胞系來源于人成視網(wǎng)膜細(xì)胞，如今也應(yīng)用于重組蛋白的表達(dá)和單克隆抗體（Mab生產(chǎn)）的制備，以及用于治療性蛋白和單克隆抗體的生產(chǎn)。
實驗方法
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實驗結(jié)果
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結(jié)論
本實驗結(jié)果清楚地顯示了用UF水配制的粉末培養(yǎng)基（CDM4PERMab培養(yǎng)基）比市場上在售的即用型培養(yǎng)基更加適合PER.C6 EpCAM細(xì)胞系的培養(yǎng)。PER.C6 EpCAM細(xì)胞系在用UF水配制的培養(yǎng)基中培養(yǎng)后的生長特征與對照組中用即用型CDM4PERMab培養(yǎng)基培養(yǎng)后的特征相似。 此外，我們還觀察到當(dāng)實驗在Spinner Flasks中進(jìn)行時，細(xì)胞系樣品在用UF水配制的培養(yǎng)基中培養(yǎng)與用RO水配制的培養(yǎng)基中培養(yǎng)相比，細(xì)胞生長更加良好。在這項實驗中，細(xì)胞密度基本都變得很高，而O2不再是限制性因素。因此我們得出結(jié)論，RO水中因為有更高濃度的內(nèi)毒素或無機鹽，因此影響了細(xì)胞生長。
這些實驗結(jié)果都通過在Spinner Flasks中培養(yǎng)PER.C6 EpCAM細(xì)胞系而獲得的單抗產(chǎn)量得到進(jìn)一步驗證與體現(xiàn)。PER.C6 EpCAM細(xì)胞系在用Arium pro UF超純水配制的培養(yǎng)基樣品中培養(yǎng)能夠獲得zui高的單抗產(chǎn)量，對照組（使用即用型培養(yǎng)基）的產(chǎn)量稍低。這兩種情況的單抗產(chǎn)量都不同于RO水樣品，在RO水樣品中培養(yǎng)后單抗產(chǎn)量反而下降。
綜上，我們總結(jié)出Arium pro UF系統(tǒng)是用于PER.C6 EpCAM細(xì)胞系的細(xì)胞培養(yǎng)的，因為該水系統(tǒng)將水中的雜質(zhì)含量降到了zui低，如無機離子，有機化合物等，尤其是將內(nèi)毒素含量降為痕量的水平。這一結(jié)果在的實驗中也得到了驗證[4]。
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參考文獻(xiàn)/更多信息
[1] ASTM Standard Guide for Bio-Applications Grade Water D 5196-06
[2] Whitehead P.: Water Purity and Regulations, in Medicines from Animal Cell Culture (eds. Stacey, G. and Davis, J.), John Wiley & Sons, Ltd (2007)
[3] Freshney I. R.: Culture of Animal Cells – A Manual of Basic Technique and Specialized Applications-6th edition, John Wiley & Sons, Inc. , USA (2010)
[4] Schmidt K. und Herbig E.: “Weniger ist mehr –Quantitative Endotoxinbestimmung von Reinstwasser“, Laborpraxis, 5, 36. Jhg., (2012)