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關(guān)于紅細(xì)胞裂解液，三分鐘您就懂
閱讀：1903 發(fā)布時間：2023-3-16
紅細(xì)胞膜是由磷脂、膽固醇、蛋白質(zhì)等組成的雙層膜結(jié)構(gòu)。在紅細(xì)胞裂解液中，主要包含了陰離子表面活性劑(如十二烷基磺酸鈉)和滲透壓調(diào)節(jié)物(如葡萄糖)，這些物質(zhì)可以分解紅細(xì)胞膜，使紅細(xì)胞釋放出血紅蛋白。作用機(jī)制主要有以下幾種：滲透裂解，通過改變細(xì)胞內(nèi)外環(huán)境的滲透壓差，使細(xì)胞溶解；離子置換，與細(xì)胞內(nèi)離子互相置換，從而使細(xì)胞發(fā)生溶解；肌動蛋白降解，針對肌動蛋白進(jìn)行降解，從而實現(xiàn)紅細(xì)胞的裂解。
紅細(xì)胞裂解液的應(yīng)用：
(1)蛋白質(zhì)提取
可用于體積小，難以直接提取的組織和細(xì)胞類型中的蛋白質(zhì)提取。同時水解的SDS還能夠增加樣品的可讀性。
(2)紅細(xì)胞計數(shù)
血液學(xué)領(lǐng)域中，被廣泛應(yīng)用于紅細(xì)胞計數(shù)和血液分類。將血液樣品經(jīng)過裂解后，可使紅細(xì)胞溶解，方便計數(shù)并分析。
(3)其他應(yīng)用
除此之外，還用于單核細(xì)胞分離、細(xì)胞周期分析、人工光合成等方面的研究。
實驗室通常采用十二烷基磺酸鈉(SDS)或三辛基氧化鋁(TOPO)等表面活性劑與葡萄糖混合作為裂解液。將10g/l的SDS加入到20mM/L的Tris-HCl緩沖液中，并在4℃條件下混合過夜；加入可溶性的葡萄糖達(dá)到4%(w/v)的濃度懸濁液制備完成。紅細(xì)胞裂解液應(yīng)存放于4℃冰箱中，避免陽光直射，因為溫度過高可能會分解該液體中的葡萄糖，導(dǎo)致失效。此外，裂解液也需注意避免污染，建議使用濾器或滅菌裝置來凈化。一般情況下，儲存期限不超過12個月。