ELISA試劑盒又稱為酶聯(lián)免疫試劑盒，是現(xiàn)在很多生物制藥廠和醫(yī)療實驗室常用的檢測設(shè)備，主要的試驗方法就是酶聯(lián)免疫吸附方法。
ELISA是將酶催化的放大作用與特異性抗原抗體反應結(jié)合起來的一種微量分析技術(shù)。酶標記抗原或抗體以后，既不影響抗原抗體反應的特異性，也不改變酶本身的活性。因為ELISA試劑盒價格低廉且準確性搞、反應時間短等優(yōu)點，所以適合大批量的檢測，一般常常用于食品安全檢測方面。
ELISA試劑盒17個相關(guān)操作技巧如下:
1.切記在加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
2.合理安排檢測量,以免反應板過多造成洗板等待時間長。
3.在吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
4.務必做雙孔實驗,這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準確性,又能反映出試劑盒的精密度。
5.樣品稀釋液應用加液器加注,并經(jīng)常校對其準確性。
6.為防止樣品蒸發(fā),試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標板加上蓋或覆膜。
7.未使用完的酶標板或者試劑,請于2-8℃保存。過氧化物酶標記抗人IgG工作液請依據(jù)所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過的過氧化物酶標記抗人IgG工作液。
8.ELISA試劑盒實驗中,加樣后及時放人孵箱,標本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導致非特異性結(jié)合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。
9.剩余樣品及廢棄物應經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘,或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。
10.人ELISA試劑盒洗滌時各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。
11.每次實驗留一孔作為空白調(diào)零孔,該孔不加任何試劑,只是最后加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調(diào)OD值至零。
12.手工洗板時每次加入洗滌液后。應靜置15～30s,不要將一個酶標孑L中的洗滌液濺入另一酶標孔中,防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標板放在毛巾或吸水紙上拍干。
13.對樣本的結(jié)果有疑問時需要使用其他檢測方法進行驗證。
14.沒有去離子水或雙蒸水時,可以使用娃哈哈純凈水配制溶液,切勿使用自來水。
15.在使用微量加樣器時,吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭,即使吸取標準品溶液。
16.吸取液體時速度不易太快,以免產(chǎn)生氣泡,人ELISA試劑盒吸取的量不夠準確。
17.吸取液體時要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸,減少誤差。
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