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Cellartis iPS向血管內(nèi)皮細胞定向分化培養(yǎng)的培養(yǎng)要求及方法

閱讀:1105      發(fā)布時間:2024-1-19
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CellartisiPS細胞向血管內(nèi)皮細胞定向分化的培養(yǎng)要求及方法如下:  
培養(yǎng)基準備:  
血清基礎(chǔ)培養(yǎng)基:使用高質(zhì)量的無血清iPSC培養(yǎng)基作為基礎(chǔ)培養(yǎng)基。  
定向分化因子添加物:添加特定的生長因子和信號通路激動劑,如BMP4、ActivinA、bFGF等。  
iPSC預(yù)處理:  
擴增iPSC:將iPSC在6孔板上進行擴增至適當數(shù)量,并確保其處于良好的生長狀態(tài)。  
預(yù)處理細胞:在預(yù)處理之前,應(yīng)將iPSC從無血清培養(yǎng)條件中轉(zhuǎn)移到有血清或低濃度因素(例如ActivinA)的培養(yǎng)條件中。  
向血管內(nèi)皮細胞定向分化:  
洗滌和收獲:將預(yù)處理的iPSC用PBS洗滌后,加入含有特定分化因子和激動劑的新鮮補給液。  
分化過程控制:根據(jù)具體方案,在不同時間點以不同方式對細胞進行誘導(dǎo)??赡苄枰{(diào)整各種因素,如濃度、時間和順序等。  
收獲細胞:根據(jù)所需的分化程度和時間,收獲相應(yīng)的血管內(nèi)皮細胞。  
血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng):  
培養(yǎng)基轉(zhuǎn)換:將收獲的血管內(nèi)皮細胞轉(zhuǎn)移到血管內(nèi)皮細胞特定的培養(yǎng)基中。常用的培養(yǎng)基包括EndothelialCellGrowthMedium(EGM)。  
經(jīng)常更換培養(yǎng)基:每隔2-3天更換一次新鮮的培養(yǎng)基,以保持適宜的營養(yǎng)供應(yīng)和環(huán)境條件。  
貼壁培養(yǎng):將血管內(nèi)皮細胞接種在貼壁組織培養(yǎng)器皿上,如6孔板或96孔板,并確保其附著并擴增。  
請注意,在進行任何實驗操作之前,請參考Cellartis提供的詳細實驗方案和技術(shù)資料,并按照相關(guān)安全規(guī)范操作。

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