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麥康凱瓊脂培養(yǎng)基介紹
閱讀：56 發(fā)布時(shí)間：2025-5-7麥康凱瓊脂培養(yǎng)基（MacConkey Agar，MAC）全面解析
一、基本介紹
麥康凱瓊脂培養(yǎng)基是一種選擇性及鑒別性培養(yǎng)基，由Alfred Theodore MacConkey于1905年研制，主要用于腸道致病菌的分離與鑒定。其核心設(shè)計(jì)邏輯為：
選擇性抑制：通過膽鹽抑制革蘭氏陽性菌（如葡萄球菌、鏈球菌），但允許部分腸球菌及沙門氏菌生長；
鑒別功能：利用乳糖發(fā)酵差異，通過指示劑顏色區(qū)分細(xì)菌代謝特性。
二、核心成分與配方
| 成分 | 作用機(jī)制 |
|---|---|
| 蛋白胨、脙胨 | 提供碳源、氮源、維生素及生長因子，支持細(xì)菌基礎(chǔ)代謝。 |
| 膽鹽（豬/牛/羊） | 抑制革蘭氏陽性菌，但對沙門氏菌、志賀氏菌等腸道致病菌抑制較弱。 |
| 乳糖 | 作為發(fā)酵底物，分解產(chǎn)酸（如大腸埃希菌）或不分解（如沙門氏菌）。 |
| 中性紅 | pH指示劑，發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸時(shí)菌落呈桃紅色，并形成膽鹽沉淀環(huán)。 |
| 結(jié)晶紫 | 增強(qiáng)對革蘭氏陽性菌（如腸球菌、葡萄球菌）的抑制，減少干擾。 |
| 氯化鈉 | 維持滲透壓平衡，確保細(xì)菌正常生長。 |
| 瓊脂 | 凝固劑，形成固體培養(yǎng)基表面。 |
典型配方（每升）：
蛋白胨 20g、乳糖 10g、氯化鈉 5g、膽鹽 5g、中性紅 0.03g、瓊脂 14g，pH 7.2±0.2。
三、作用機(jī)制與鑒別原理
選擇性抑制：
膽鹽破壞革蘭氏陽性菌細(xì)胞膜，抑制其生長；
結(jié)晶紫進(jìn)一步增強(qiáng)對腸球菌和葡萄球菌的抑制，但沙門氏菌等腸道菌可耐受。
乳糖發(fā)酵鑒別：
發(fā)酵乳糖菌（如大腸埃希菌）：產(chǎn)酸使菌落呈桃紅色，周圍形成膽鹽沉淀環(huán)（因酸與膽鹽反應(yīng)）。
不發(fā)酵乳糖菌（如沙門氏菌、志賀氏菌）：菌落無色或淡黃色，無沉淀環(huán)。
遲緩發(fā)酵菌（如宋內(nèi)志賀氏菌）：菌落中心偏紅，邊緣無色。
四、應(yīng)用場景
臨床檢驗(yàn)：
糞便、分泌物中腸道致病菌（沙門氏菌、志賀氏菌、致瀉性大腸桿菌）的分離；
腸球菌的篩選與鑒定。
科研應(yīng)用：
耐藥菌株篩選（如添加壯觀霉素篩選鴨源沙門氏菌）；
菌株融合研究（如通過抗藥性標(biāo)記篩選融合菌株）。
特殊改良配方：
低鹽MAC：減少氯化鈉以抑制變形桿菌蔓延生長；
山梨醇MAC：替換乳糖用于分離O157大腸埃希氏菌（不發(fā)酵山梨醇）；
含抗生素MAC：添加氨芐青霉素、多粘菌素B等篩選特定耐藥菌。
五、制備方法
配制：
稱取54g培養(yǎng)基干粉溶于1L蒸餾水，加熱煮沸至溶解。
滅菌：
分裝后121℃高壓滅菌15分鐘，滅菌后搖勻防止瓊脂沉積。
傾注平板：
冷卻至50-55℃時(shí)加入滅菌的結(jié)晶紫和中性紅溶液，混勻后傾注平板。
六、使用注意事項(xiàng)
樣本處理：
糞便、分泌物等可直接接種，固體樣本需稀釋后涂布。
培養(yǎng)條件：
35-37℃培養(yǎng)18-24小時(shí)，觀察菌落顏色與形態(tài)。
結(jié)果解讀：
結(jié)合生化試驗(yàn)（如吲哚試驗(yàn)、氧化酶試驗(yàn)）和血清學(xué)試驗(yàn)進(jìn)一步鑒定。
局限性：
某些特殊需求菌株（如嚴(yán)格厭氧菌）可能無法生長；
需定期驗(yàn)證培養(yǎng)基性能（如接種大腸埃希菌和金黃色葡萄球菌驗(yàn)證選擇性）。
七、總結(jié)
麥康凱瓊脂培養(yǎng)基通過膽鹽抑制與乳糖發(fā)酵指示，實(shí)現(xiàn)了對腸道致病菌的高效分離與鑒別。其成分可調(diào)、用途廣泛，是臨床微生物檢驗(yàn)和科研中的工具。隨著研究深入，改良配方不斷拓展其應(yīng)用場景，為微生物學(xué)研究提供了有力支持。