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尿素氮檢測試劑盒

尿素氮（BUN）試劑盒說明書
分光光度法
?尿素氮檢測試劑盒
產地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷8三樓
英文名稱：Urea nitrogen content test kit
產品商標：solarbio
貨號：BC1530
規(guī)格：50T/48S
保存與運輸：4℃保存或-20℃保存；            
參考價格：180
庫存狀態(tài)：現貨
關鍵詞：尿素氮檢測|尿素氮測定|尿素氮|BUN|BUN檢測
產品內容：
標準品：液體1mL×1 支，4℃保存。
試劑一：粉劑×1 瓶，4℃避光保存，臨用前加10mL 蒸餾水充分溶解。
試劑二：液體20mL×1 瓶，4℃避光保存。
試劑三：液體 20mL×1 瓶，4℃避光保存。

產品說明：
尿素是生物體內含氮化合物分解的終產物，在尿酶催化下分解轉化成氨。血液尿素氮是腎功能的主要指標之一。在堿性條件下，尿酶水解尿素產生氨，氨與次氯酸反應生成氯胺，再與酚衍生物作用生成綠色吲哚酚，在630nm 處有特征吸收峰。

自備實驗用品及儀器：
天平、研缽、常溫離心機、可見分光光度、1ml玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。

操作步驟：
一、樣品處理
1. 組織：按照質量（g）：蒸餾水體積(mL)為 1：5-10 的比例（建議稱取約0.1g，加入1mL蒸餾水），勻漿后于25℃，12000rpm 離心10min，取上清待測。
2. 細胞：按照細胞數量（104個）：蒸餾水體積（mL）為500-1000：1 的比例（建議500萬個細胞加入1mL 蒸餾水），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3 s，間隔7 s，總時間3min）；然后4℃，10000g 離心10min，取上清置于冰上待測。
3. 血清或其它液體：直接檢測。

二、測定操作

空白管      標準管       測定管
樣品（μL）              -            -          100
標準品（μL）            -           100          -
H2O（μL）             100           -           -
試劑一（μL）           200          200         200
充分混勻，于 37℃反應 10min
試劑二（mL）           350          350         350
試劑三（mL）           350          350         350
充分混勻，于 37℃顯色 10min，于微量石英比色皿，雙蒸水調零，測定 630nm 處吸光值，記為 A 空白管、A 標準管和 A 測定管

三、計算公式：
1. 按樣本質量計算：
尿素氮含量（mg/g）= （A測定管- A空白管）/（A標準管- A空白管）×C 標準品÷W= 0.005×（A測定管- A空白管）/（A標準管- A空白管）÷W
2. 按細胞數計算：
尿素氮含量（mg/104 cell）= （A測定管- A空白管）/（A標準管- A空白管）×C 標準品÷細胞數量= 0.005×（A測定管- A空白管）/（A標準管- A空白管）÷細胞數量
3. 按液體體積計算：
尿素氮含量（mg/L）=（A測定管- A空白管）/（A標準管- A空白管）×C 標準品=5×（A測定管- A空白管）/（A標準管- A空管）

C 標準品：標準品濃度，5mg/L；
W：樣品質量，g

注意事項：
1. 配制好的試劑一在2-8℃條件下可保存一周。
2. 低檢出限為80μg/L。

相關文獻：
《PVT1 knockdown alleviates vancomycin-induced acute kidney injury by targeting miR-124 via inactivation of NF-κB signaling》 作者:Xiaoguang Zhu, Jun Shi, Huicong li and Fang Chen 期刊:RSC advances 影響因子:3.049 PMID:30184744