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紹興市上虞星星儀器設備有限公司>>技術文章>>722型分光光度計的原理及使用方法

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722型分光光度計的原理及使用方法

閱讀:5621        發(fā)布時間:2015-9-29

一、 測量原理                

分光光度法測量的理論依據是伯郎—比耳定律:當容液中的物質在光的照射和激發(fā)下,產生了對光吸收的效應。但物質對光的吸收是有選擇性的,各種不同的物質都有其各自的吸收光譜。所以根據定律當一束單色光通過一定濃度范圍的稀有色溶液時,溶液對光的吸收程度A與溶液的濃度cg/l)或液層厚度b(cm)成正比。其定律表達式A=abca是比例系數)。當c的單位為mol/l時,比例系數用ε表示,則A=εbc稱為摩爾吸光系數。其單位為L·mol-1·cm-1它是有色物質在一定波長下的特征常數。T(透光率)=I/I0A(吸光度)= -lgTA=K·C·L(比色皿的厚度)測定時,入射光I,吸光系數和溶液的光徑長度不變時,透過光是根據溶液的濃度而變化的,即“K"為常數。比色皿厚度一定,“L"、“I0"也一定。只要測出A即可算出“C"。        《分光光度計的表頭上,一行是透光率,一行是吸光度?!?/span>       

二、 722型分光光度計的使用        

1、將靈敏度旋鈕調“1"檔(信號放大倍率?。?/span>        

2、開啟電源,指示燈亮 ,選擇開關置于“T",波長調到測試用波長。儀器預熱20分鐘。          

3、打開試樣室(光門自動關閉),調節(jié)透光率零點旋鈕,使數字顯示為000.0。(調節(jié)100%T旋鈕),蓋上試樣室蓋,將比色皿架處于蒸餾水校正位置,使光電管受光,調節(jié)透光率100%旋鈕使數字顯示100.0。如顯示不到100.0,則可適當增加微電流放大的倍數。(增加靈敏度的檔數同時應重復(3)調節(jié)儀器透光率的“0"位)但盡量使倍率置于低檔使用。這樣儀器會有更高的穩(wěn)定性。         

4、預熱后,按(3)連續(xù)幾次調整透光率的“0"位和“100%"的位置,待穩(wěn)定后儀器可進行測定工作。      

三、 吸光度“A"的測量        

將選擇開關置于A 。調節(jié)吸光度調零旋鈕,使得數字顯示為零,然后將被測樣品移入光路,顯示值即為被測樣品的吸光度值。       

四、 濃度c的測量        

將選擇開關由“A"旋“C"將已標定濃度的樣品放入光路,調節(jié)濃度旋鈕,使得數字顯示為標定值,將被測樣品放入光路即可讀出被測樣品的濃度值。     

注意事項:       

1、測量完畢,速將暗盒蓋打開,關閉電源開關,將靈敏度旋鈕調低檔,取出比色皿,將裝有硅膠的干燥劑袋放入暗盒內,關上蓋子,將比色皿中的溶液倒入燒杯中,用蒸餾水洗凈后放回比色皿盒內。

2、每臺儀器所配套的比色皿不可與其它儀器上的表面皿單個調換。 

使用方法  

1)預熱儀器  將選擇開關置于“T",打開電源開關,使儀器預熱20分鐘。為了防止光電管疲勞,不要連續(xù)光照,預熱儀器時和不測定時應將試樣室蓋打開,使光路切斷。  

2)選定波長  根據實驗要求,轉動波長手輪,調所需要的單色波長。  

3)固定靈敏度檔  在能使空白溶液很好地調到“100%"的情況下,盡可能采用靈敏度較低的擋,使用時,先調到“1"擋,靈敏度不夠時再逐漸升高。但換擋改變靈敏度后,須重新校正“0%"和“100%"。選好的靈敏度,實驗過程中不要再變動。  

4)調節(jié)T=0%  輕輕旋動“0%"旋鈕,使數字顯示為“00.0",(此時試樣室是打開的)。  

5)調節(jié)T=100%  將盛蒸餾水(或空白溶液,或純溶劑)的比色皿放入比色皿座架中的格內,并對準光路,把試樣室蓋子輕輕蓋上,調節(jié)透過率“100%"旋鈕,使數字顯示正好為“100.0"。  

6)吸光度的測定  將選擇開關置于“A",蓋上試樣室蓋子,將空白液置于光路中,調節(jié)吸光度調節(jié)旋鈕,使數字顯示為“.000"。將盛有待測溶液的比色皿放入比色皿座架中的其它格內,蓋上試樣室蓋,輕輕拉動試樣架拉手,使待測溶液進入光路,此時數字顯示值即為該待測溶液的吸光度值。讀數后,打開試樣室蓋,切斷光路。   重復上述測定操作1-2次,讀取相應的吸光度值,取平均值。  

7)濃度的測定  選擇開關由“A"旋置“C",將已標定濃度的樣品放入光路,調節(jié)濃度旋鈕,使得數字顯示為標定值,將被測樣品放入光路,此時數字顯示值即為該待測溶液的濃度值。  

8)關機  實驗完畢,切斷電源,將比色皿取出洗凈,并將比色皿座架用軟紙擦凈。

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