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HPLC峰值故障排除指南

2019-1-17  閱讀(915)

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HPLC故障排除指南-峰值


峰形問題

 

 

 

峰拖尾

與活性硅醇的相互作用

1. 使用超高純度硅基(硅膠基質(zhì))固定相

(見1.1

2. 添加堿性流動(dòng)相添加劑(如TEA超高純度相則不需要

在固定相中與金屬離子螯合

同上

錯(cuò)誤的流動(dòng)相pH值(流動(dòng)相pH值不當(dāng))

1. 降低流動(dòng)相pH值以抑制硅烷醇電離(見1.2

2. 增加緩沖液濃度(見1.2

玻璃料阻塞(篩板堵塞)

1.  倒沖洗柱(反沖色譜柱)(見5.2

2.  使用串聯(lián)(在線)過濾器(見1.3、4.2

柱無效(色譜柱失效)

1.  倒沖洗柱(反沖色譜柱)(見5.2

2.  更換柱 (色譜柱)

死體積未清掃(過大)

1. 盡量減少連接器數(shù)量

2. 使用較短的連接管

3. 檢查所有配件是否緊固

分裂峰

保護(hù)柱或分析柱入口(進(jìn)樣)端污染

1.        拆下保護(hù)柱卡套(卸除保護(hù)柱芯)并進(jìn)行分析 必要時(shí)更換保護(hù)柱

2.        倒沖洗(反沖)分析柱(見5.2

3.        對(duì)于頑固殘留(強(qiáng)保留污染物),應(yīng)嘗試再生法(對(duì)色譜柱進(jìn)行再生)(見5.2

4.        更換柱

玻璃料阻塞 (篩板堵塞)

1.  倒沖洗柱(反沖色譜柱)(見5.2

2.  使用串聯(lián)(在線)過濾器(見1.3、4.2

樣品溶劑與流動(dòng)相不兼容

1. 在流動(dòng)相中注入樣品 (用流動(dòng)相溶解樣品)

同時(shí)洗脫第二組分

1.        注射前使用樣品清理 (進(jìn)樣前先凈化樣品)

2.        通過改變流動(dòng)相或柱相(色譜柱固定相) 來改變選擇性

柱超載(色譜柱過載)

1. 使用更高容量的固定相

2. 增加柱的直徑 (增加色譜柱內(nèi)徑)

3. 減少樣本(樣品)量

 

柱中通道的形成 (色譜柱內(nèi)形成通道)

1.        更換柱 (色譜柱)

2.        在建議的色譜柱(色譜柱建議的)pH值范圍內(nèi)操作(見1.5

柱超載 (色譜柱過載)

1.        注入更少量或更稀釋的樣品溶液 (減少進(jìn)樣體積或進(jìn)一步稀釋樣品)

2.        使用更高容量的固定相

樣品溶劑與流動(dòng)相不兼容

1在流動(dòng)相中注入樣品(用流動(dòng)相溶解樣品進(jìn)樣)

低溫

1. 增加柱的溫度 (升高柱溫)

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