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青島捷世康生物科技有限公司
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DNA重組技術(shù)的基本過程

時間:2016-3-28閱讀:1308
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蛋白質(zhì)工程介紹:

    1982年,Palmiter等人將大白鼠的 生長激素基因放在小白鼠金屬疏基蛋白啟動子之后的質(zhì)粒中。

    這個啟動子通常在染色體上,并控制金屬疏基蛋白的轉(zhuǎn)錄。金屬疏基蛋白富含半肽氨酸,對重金屬有很高的親和力。肝臟在合成這種保護性蛋白時要依靠重金屬,如鎘的誘導。

   將重組好的這種質(zhì)粒(幾百個拷貝)用特制的微量注射器注入小白鼠受精卵植入小白鼠子宮。結(jié)果發(fā)育生成的小鼠經(jīng)DNA印跡法證明,許多小鼠中都含有大白鼠的生長激素基因,而且成熟的小鼠體重比對照大兩倍,成為“碩鼠”或“超級鼠”。這些小鼠中的生長激素水平相當于對照的500倍。試驗證明,外源基因在新的啟動子控制下,可以整合到哺乳類細胞核內(nèi),并在其中實現(xiàn)有效表達。這是一項重大的突破。

    隨后轉(zhuǎn)基因動物在各國興起。北京農(nóng)業(yè)大學也制備出轉(zhuǎn)基因豬和羊。然而轉(zhuǎn)生長激素基因的豬的繁殖能力明顯下降,不能繁殖擴群。國內(nèi)轉(zhuǎn)基因動物也出現(xiàn)了畸形等。這些問題的出現(xiàn)表明轉(zhuǎn)基因技術(shù)中有關(guān)外源基因與染色體的定位重組、表達調(diào)控等,還有待深入研究。

    但轉(zhuǎn)基因技術(shù)仍然是有用的。1991年,蘇格蘭人首先將a1-抗胰蛋白酶基因置于綿羊的乳球蛋白基因的調(diào)控成分之下,制成轉(zhuǎn)基因綿羊。當這種綿羊長大繁殖,乳腺內(nèi)基因開發(fā)表達奶中各種蛋白時,a1-抗胰蛋白酶基因在球蛋白調(diào)控成分調(diào)控下也開發(fā),結(jié)果表達出a1-抗胰蛋白酶(一種藥物),奶中含量高達35g/L,產(chǎn)量十分可觀。這種轉(zhuǎn)基因的動物稱為“生物反應器”,它潛在的經(jīng)濟效應將促進這項技術(shù)的發(fā)展。

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