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豬凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)elisa檢測試劑盒實驗步驟

閱讀:1064        發(fā)布時間:2015-5-8

豬凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)elisa檢測試劑盒實驗步驟:

1、試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未

用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2、濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。

3、各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間

控制在 5 分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。

4、請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本 OD 值

大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的 OD 值) ,請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定,計

算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5) 。

5、封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6、底物請避光保存。

7、嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8、所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9、本試劑不同批號組分不得混用。

10、如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。

豬凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)elisa檢測試劑盒實驗原理:

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中豬凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)水平。用純化的豬凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入凋亡誘導(dǎo)因子(AIF),再與HRP標(biāo)記的凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中豬凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)濃度。

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