導(dǎo)  語

截至目前，已累計約500萬人次感染新型冠狀病毒。在當(dāng)前新型冠狀病毒肆虐的大背景下，新疫苗、新治療藥物由于需經(jīng)過較長周期的臨床試驗以確保其安全性，無法迅速應(yīng)用于臨床；因此，老藥新用不免為一種積極嘗試，硫酸羥氯喹（Hydroxychlorquine sulfate，CAS#：747-36-4）即是其中一種。

硫酸羥氯喹于1955年在美國上市，目前已在加拿大、法國、德國、澳大利亞、中國、日本等70多個國家獲得批準(zhǔn)。初硫酸羥氯喹被用于治療瘧疾，后來臨床發(fā)現(xiàn)此藥物具有輕度免疫抑制和免疫調(diào)節(jié)的作用。自新冠肺炎疫情在擴散以來，有部分臨床研究報道硫酸羥氯喹對于新型冠狀病毒感染患者有效；此外,美國總統(tǒng)特朗普在多個*場合親自“帶貨”，更是引發(fā)了美國、印度、巴西、新加坡等國對于硫酸羥氯喹的熱潮。

（圖片來源于網(wǎng)絡(luò)）

為了規(guī)范用藥、減少用藥安全問題，美國FDA于3月28號發(fā)布了硫酸羥氯喹用于治療COVID-19住院患者的緊急使用授權(quán)，并在4月14日發(fā)布了硫酸羥氯喹的BE指南。

盡管目前仍無確鑿研究表明硫酸羥氯喹可以對抗新冠病毒，但世界各國對硫酸羥氯喹及其原料藥（API）的關(guān)注度已逐漸升溫。印度是硫酸羥氯喹大的生產(chǎn)國之一，約占供應(yīng)量的一半。此前印度已經(jīng)批準(zhǔn)該藥用于預(yù)防新冠病毒感染，目前已經(jīng)向*上百個國家出口了8000多萬片硫酸羥氯喹。隨著印度近期將該藥列入禁止出口原料藥名單的事件發(fā)酵，硫酸羥氯喹及相關(guān)原料供貨價格已瘋漲。硫酸羥氯喹生產(chǎn)國的產(chǎn)能及出口規(guī)模在短期內(nèi)呈現(xiàn)出爆發(fā)增長；有消息報道，自3月20日以來，國內(nèi)某制藥廠商生產(chǎn)的硫酸羥氯喹，5天內(nèi)已出口原料藥4.9噸。

為了應(yīng)對預(yù)期增長的藥品質(zhì)量控制及臨床藥物濃度監(jiān)測需求，本文遵照EP10.0（歐洲藥典）、USP43（美國藥典），開發(fā)了硫酸羥氯喹有關(guān)物質(zhì)、硫酸羥氯喹片含量測定的HPLC（以及UHPLC）方法；此外參考FDA關(guān)于生物樣品分析指導(dǎo)原則及硫酸羥氯喹BE指南，開發(fā)了LCMS-8050監(jiān)測人血漿中硫酸羥氯喹含量的測定方法。

1. EP方法測試硫酸羥氯喹有關(guān)物質(zhì)（使用超高效液相色譜系統(tǒng)LC-30A或同等型號）

EP10.0中要求雜質(zhì)C與硫酸羥氯喹、雜質(zhì)B與雜質(zhì)C分離度均需≥3.0。

圖1. 硫酸羥氯喹有關(guān)物質(zhì)色譜圖

結(jié)果顯示，雜質(zhì)C與硫酸羥氯喹、雜質(zhì)B與雜質(zhì)C分離度*要求。

2. USP方法測試硫酸羥氯喹片含量（使用高效液相色譜系統(tǒng)LC-2040C 3D或同等型號）

圖2. 硫酸羥氯喹與磷酸氯喹標(biāo)準(zhǔn)樣品色譜圖

結(jié)果表明硫酸羥氯喹與磷酸氯喹分離度為3.728，*要求。

3. LCMS-8050測定人血漿中硫酸羥氯喹含量

人血漿樣品經(jīng)乙腈沉淀蛋白后離心取上清進樣分析，硫酸羥氯喹在0.5~500 ng/mL范圍內(nèi)線性良好，相關(guān)系數(shù)大于0.998；方法定量限為0.5 ng/mL；硫酸羥氯喹低、中、高濃度樣品日內(nèi)精密度在1.57~8.33 %之間；準(zhǔn)確度在97.91~106.02 %之間；硫酸羥氯喹低、中、高濃度樣品及內(nèi)標(biāo)的基質(zhì)效應(yīng)在98.31~108.17 %之間；使用LCMS-8050三重四極桿液質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)可在10 min內(nèi)對血漿中硫酸羥氯喹含量進行測定。

圖3. 空白血漿及含硫酸羥氯喹血漿樣品（200 ng/mL）    圖4. 空白血漿及含磷酸氯喹血漿樣品（100 ng/mL）

LC-2030/2040 series                                   LC-40

LCMS-8050

采用島津液相色譜系統(tǒng)，依照EP10.0方法及USP43方法，可以很好的對硫酸羥氯喹原料藥及其制劑質(zhì)量控制的要求；在硫酸羥氯喹需求激增的背景下，保證藥品質(zhì)量。在此基礎(chǔ)上開發(fā)的LCMS-8050監(jiān)測人血漿中的硫酸羥氯喹含量，則是為了進一步結(jié)合臨床指標(biāo)，準(zhǔn)確評價硫酸羥氯喹在人體內(nèi)的藥效及相互作用，指導(dǎo)更加合理、安全用藥。無論結(jié)果如何，候選藥物在質(zhì)量控制及臨床試驗等高質(zhì)量研究中的表現(xiàn)都值得被了解和不斷完善。我們將繼續(xù)關(guān)注更多科學(xué)證據(jù)的揭曉；同時更期冀在創(chuàng)新科技力量的推動下，新冠病毒能早日被有效遏制。