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一種簡單實用的細(xì)胞凍存方法
閱讀：1879 發(fā)布時間：2016-12-20
一種簡單實用的細(xì)胞凍存方法
我們實驗室一直用一種特簡單但非常安全的細(xì)胞凍存方法，與大家共享：
凍存液：一般用10%DMSO(推薦用sigema原裝的，質(zhì)量好不用預(yù)消毒)+10％血清的*培養(yǎng)基，如果細(xì)胞珍貴的話用10％DMSO＋90％全血清
降溫方法：用zui少兩厘米厚的醫(yī)用棉紗將凍存管緊緊包裹，扎緊，直接放入-70度冰箱，隔夜取出凍存管直接放液氮凍存。
復(fù)蘇效果對比：細(xì)胞凍存2周后復(fù)蘇，本方法凍存的細(xì)胞與使用程序性降溫儀凍存的細(xì)胞復(fù)蘇效果相差不大，但明顯比傳統(tǒng)4度、-20度、-70度的方法要好，傳統(tǒng)的凍存方法不但費時費力，而且各時間段的放置時間并無嚴(yán)格統(tǒng)一，尤其在4度和-20度時間不好掌握。
要點：面紗包裹一定要足夠厚，細(xì)胞用凍存液重懸后不要在常溫放置太長時間。從-70度取細(xì)胞的時間無嚴(yán)格控制，我們曾經(jīng)放過一個星期后在入液氮，同樣可以順利復(fù)蘇。
不知是否有人發(fā)過，給沒有嘗試過的戰(zhàn)友試一下，我們從國外購買的5000元一支的細(xì)胞一直用著方法凍存。