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一種簡單實用的細胞凍存方法

閱讀:1880        發(fā)布時間:2016-12-20

一種簡單實用的細胞凍存方法

我們實驗室一直用一種特簡單但非常安全的細胞凍存方法,與大家共享:
凍存液:一般用10%DMSO(推薦用sigema原裝的,質(zhì)量好不用預消毒)+10%血清的*培養(yǎng)基,如果細胞珍貴的話用10%DMSO+90%全血清
降溫方法:用zui少兩厘米厚的醫(yī)用棉紗將凍存管緊緊包裹,扎緊,直接放入-70度冰箱,隔夜取出凍存管直接放液氮凍存。
復蘇效果對比:細胞凍存2周后復蘇,本方法凍存的細胞與使用程序性降溫儀凍存的細胞復蘇效果相差不大,但明顯比傳統(tǒng)4度、-20度、-70度的方法要好,傳統(tǒng)的凍存方法不但費時費力,而且各時間段的放置時間并無嚴格統(tǒng)一,尤其在4度和-20度時間不好掌握。
要點:面紗包裹一定要足夠厚,細胞用凍存液重懸后不要在常溫放置太長時間。從-70度取細胞的時間無嚴格控制,我們曾經(jīng)放過一個星期后在入液氮,同樣可以順利復蘇。
不知是否有人發(fā)過,給沒有嘗試過的戰(zhàn)友試一下,我們從國外購買的5000元一支的細胞一直用著方法凍存。

 

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