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液體ECC(定量)顯色培養(yǎng)基說(shuō)明書(shū)

2021-6-24 閱讀(2838)

液體ECC(定量)顯色培養(yǎng)基說(shuō)明書(shū)

液體ECC(定量)顯色培養(yǎng)基說(shuō)明書(shū)

可同時(shí)對(duì)水樣中β-葡萄糖醛酸酶陽(yáng)性大腸桿菌和大腸菌群檢測(cè)和計(jì)數(shù)

組 分

蛋白胨和酵母粉:16.0 g/L   

氯化鈉:5.0 g/L  

色素:4.5 g/L

pH值 7.1

 

操作

1、取瓶?jī)?nèi)干粉25.5 g溶于1000mL去離子水的潔凈三角瓶中,充分?jǐn)嚢杌靹?。也可根?jù)需要按照25.5 g/L的比例擴(kuò)大或縮小制備培養(yǎng)基的量。

2、加熱至100,不停攪拌,使其*溶解。切勿加熱超過(guò)100,切勿121高壓滅菌。若使用微波爐加熱,應(yīng)將培養(yǎng)基加熱沸騰,立即移出,輕輕搖勻,再放入微波爐加熱,觀察小氣泡變?yōu)榇髿馀?,直?溶解即可。切勿使培養(yǎng)基溢出。

3、冷卻至室溫備用。

 

接種

樣品(如水樣)可按以下步驟進(jìn)行:

  • 1.將墊片A放于培養(yǎng)皿內(nèi)。       
  • 2.用移液管移取2.0 ml制備好的培養(yǎng)基加入墊片A上。
  • 3.取出膜B,將膜B置于過(guò)濾系統(tǒng)中。
  • 4.將水樣置于過(guò)濾系統(tǒng)中抽濾。
  • 5.取出抽濾后的膜B,將膜B放于含有墊片A的培養(yǎng)皿內(nèi)。
  • 6.將含有A和B的培養(yǎng)皿置于35±2恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18-24h后即可讀取結(jié)果(注:不要倒置培養(yǎng)皿)。

 

結(jié)果

微生物(Microorganism)

菌落顏色

大腸桿菌(E.coli

藍(lán)色

其他大腸菌群(Other coliform bacteria)

紫色

其他革蘭氏陰性菌(Other Gram negative bacteria)

無(wú)色或抑制

 

性能及局限

對(duì)大腸桿菌靈敏度和特異性分別為99.1%和96.9%(Ho and Tam 1997)。葡萄糖醛酸酶陰性大腸桿菌(如:大腸桿菌O157)可能出現(xiàn)假陰性結(jié)果,如果主要研究病原菌如大腸桿菌O157,可選用科瑪嘉大腸桿菌O157顯色培養(yǎng)基。若研究主要研究總大腸菌群,罕見(jiàn)的哈夫尼菌屬出現(xiàn)假陰性結(jié)果,為無(wú)色菌落。

 

貯存條件

干粉需保存于15℃~30干燥環(huán)境中,在有效期前使用。制備好的液體培養(yǎng)基在冰箱內(nèi)保存2周(2~8,避光)。

 

污染處理

使用過(guò)的培養(yǎng)基需要在121滅菌至少20分鐘才可以按照有關(guān)規(guī)定丟棄。

 

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