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更多關(guān)于小鼠胚胎成纖維細胞的知識

閱讀:1713      發(fā)布時間:2022-8-11
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  小鼠胚胎成纖維細胞用于支持鼠和人多功能干細胞的生長。該細胞不僅能提供多能性干細胞生長的物質(zhì),也能分泌維持干細胞多能性的關(guān)鍵生長因子。該細胞從大鼠胚胎中分離,并在早期起作用。作為飼養(yǎng)層細胞,必須通過輻射阻止該細胞的增殖。經(jīng)處理的細胞也能用于產(chǎn)生有用的培養(yǎng)基,用于自由飼養(yǎng)的多能性干細胞的培養(yǎng)。  
  小鼠胚胎成纖維細胞培養(yǎng)方法:
 
  傳代方法 將舊培養(yǎng)液吸除,PBS清洗兩遍后,加入6mL(/100mm皿)胰酶,在顯微鏡下觀察,期間禁止搖晃培養(yǎng)皿,細胞剛有脫落時,則吸除大部分胰酶,留約0.5mL,移至培養(yǎng)箱消化,約3min取出。傳代用12mL CM1-1培養(yǎng)液終止消化,輕輕吹打均勻細胞,后可分3~6皿培養(yǎng);
 
  生長條件 :37℃,5%CO2,CM1-1培養(yǎng)液。CM1-1培養(yǎng)液:90%DMEM-H+10?S。DMEM-H:DMEM高糖培養(yǎng)液,含谷氨酰胺,丙酮酸鈉。
 
  存儲條件:凍存則用6mL凍存液(90?S+10%DMSO)終止消化,吹打均勻,分為6支凍存管,用程序降溫盒于-80℃凍存,過夜移至液氮中保存。

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