1、計算稱量

根據(jù)待檢樣品屬性計算出所需的不同培養(yǎng)基的體積，根據(jù)說明書進行準確稱量；電子天平需開機預(yù)熱30min后使用，稱量過程中手要穩(wěn)，避免將培養(yǎng)基灑落在天平稱量盤中，若灑落，應(yīng)立即停止稱量，使用潔凈布擦干粉末，重新調(diào)“0"后稱量。

2、溶化

對于可溶性淀粉,先用少量冷水調(diào)成糊狀,再放入沸水中；不易溶解的培養(yǎng)基，先加入少量純化水振搖溶解后，二次加水配制；需分裝的培養(yǎng)基，需溶解，含瓊脂的培養(yǎng)基需加熱融化，溶解后，分裝至不同容器中進行滅菌。

3、分裝

如果要制作斜面培養(yǎng)基，須將培養(yǎng)基分裝于試管中。如果要制作平板培養(yǎng)基或液體、半固體培養(yǎng)基，則須將培養(yǎng)基分裝于錐形瓶內(nèi)。分裝時，一手捏松彈簧夾，使培養(yǎng)基流出，另一只手握住幾支試管或錐形瓶，依次接取培養(yǎng)基。分裝時，注意不要使培養(yǎng)基粘附管口或瓶口，以免引起雜菌污染。裝入試管的培養(yǎng)基量，視試管和錐形瓶的大小及需要而定。一般制作斜面培養(yǎng)基時，每只15×150毫米的試管，約裝3～4毫升（1/4～1/3試管高度），如制作深層培養(yǎng)基，每只20×220毫米的試管約裝12～15毫升。

4、加塞

分裝完畢后，需要用硅膠塞堵住管口或瓶口。主要目的是過濾空氣，避免污染。不要用脫脂棉，以免因脫脂棉吸水使棉塞無法使用。塞入管口或瓶口中的硅膠塞，應(yīng)緊貼內(nèi)壁不留縫隙，以防空氣中微生物沿褶皺侵入，塞好后，以手提塞，管、瓶不下落為合適；硅膠塞的2/3應(yīng)在管內(nèi)，上端露出少許便于拔取。

5、包扎

塞好塞的試管和錐形瓶應(yīng)蓋上牛皮紙用繩扎緊，同時貼上標簽，注明培養(yǎng)基的名稱、組別、配制日期后，準備滅菌。

6、滅菌

根據(jù)培養(yǎng)基說明書規(guī)定的滅菌參數(shù)進行滅菌。滅菌后，如制作斜面培養(yǎng)基和平板培養(yǎng)基，須趁培養(yǎng)基未凝固時進行。