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實(shí)現(xiàn)原代細(xì)胞的分離的技術(shù)方法

時(shí)間:2018/2/8閱讀:347
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原代細(xì)胞是一種在功能水平上對(duì)單細(xì)胞或其他生物粒子進(jìn)行定量分析和分選的檢測(cè)手段,可以每秒鐘分析上萬個(gè)細(xì)胞,并能同時(shí)從一個(gè)細(xì)胞中測(cè)得多個(gè)參數(shù)。

細(xì)胞分選的原理

當(dāng)經(jīng)熒光染色或標(biāo)記的單細(xì)胞懸液放入樣品管中,被高壓壓入流動(dòng)室內(nèi)。流動(dòng)室內(nèi)充滿鞘液,在鞘液的包裹和推動(dòng)下,細(xì)胞被排成單列,以一定速度從流動(dòng)室噴口噴出。在流動(dòng)室的噴口上配有一個(gè)超高頻的壓電晶體,充電后振動(dòng),使噴出的液流斷裂為均勻的液滴,待測(cè)細(xì)胞就分散在這些液滴之中。將這些液滴充以正、負(fù)不同的電荷,當(dāng)液滴流經(jīng)過帶有幾千伏的偏轉(zhuǎn)板時(shí),在高壓電場(chǎng)的作用下偏轉(zhuǎn),落入各自的收集容器中,沒有充電的液滴落入中間的廢液容器,從而實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的分離。
原代細(xì)胞不僅于表面抗原,流式細(xì)胞儀可以根據(jù)任何能檢測(cè)到的發(fā)光度(如細(xì)胞體積)或熒光(如DNA、RNA或蛋白含量,酶活性,特異抗原)散射度差異來分離細(xì)胞。如果能保證流式細(xì)胞儀的無菌狀態(tài),那么分選后的細(xì)胞還可以進(jìn)行培養(yǎng)或其他分析。
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原代細(xì)胞

 

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