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實現(xiàn)原代細胞的分離的技術方法

時間:2018/2/8閱讀:349
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原代細胞是一種在功能水平上對單細胞或其他生物粒子進行定量分析和分選的檢測手段,可以每秒鐘分析上萬個細胞,并能同時從一個細胞中測得多個參數(shù)。

細胞分選的原理

當經(jīng)熒光染色或標記的單細胞懸液放入樣品管中,被高壓壓入流動室內(nèi)。流動室內(nèi)充滿鞘液,在鞘液的包裹和推動下,細胞被排成單列,以一定速度從流動室噴口噴出。在流動室的噴口上配有一個超高頻的壓電晶體,充電后振動,使噴出的液流斷裂為均勻的液滴,待測細胞就分散在這些液滴之中。將這些液滴充以正、負不同的電荷,當液滴流經(jīng)過帶有幾千伏的偏轉板時,在高壓電場的作用下偏轉,落入各自的收集容器中,沒有充電的液滴落入中間的廢液容器,從而實現(xiàn)細胞的分離。
原代細胞不僅于表面抗原,流式細胞儀可以根據(jù)任何能檢測到的發(fā)光度(如細胞體積)或熒光(如DNA、RNA或蛋白含量,酶活性,特異抗原)散射度差異來分離細胞。如果能保證流式細胞儀的無菌狀態(tài),那么分選后的細胞還可以進行培養(yǎng)或其他分析。
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原代細胞

 

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