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雞甲狀旁腺激素(PTH)elisa酶聯(lián)免疫試劑盒操作步驟

時(shí)間:2023/6/20閱讀:184
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雞甲狀旁腺激素(PTH)elisa酶聯(lián)免疫試劑盒操作步驟:


1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

AKR1B10英文名稱:醛糖還原酶相關(guān)蛋白質(zhì)抗體

AKR1C2英文名稱:膽汁酸結(jié)合蛋白DDH2抗體

ANGPTL3英文名稱:血管生成素樣蛋白3抗體

Acylglycerol Kinase英文名稱:甘油酯激酶線粒體抗體

phospho-alpha Adducin(Ser726)英文名稱:磷酸化內(nèi)收蛋白a1抗體

ATG16L2英文名稱:自噬體ATG16L2蛋白抗體

ACPT英文名稱:酸性磷酸酶抗體

Acid Phosphatase英文名稱:酸性磷酸酶抗體

AKIP英文名稱:極光激酶A相互作用蛋白1抗體

APOL6英文名稱:載脂蛋白樣蛋白6抗體

ARTS英文名稱:凋亡相關(guān)蛋白TGFb信號(hào)抗體

A2LD1英文名稱:A2LD1蛋白抗體

A4GNT英文名稱:α1,4-N-乙酰葡糖胺轉(zhuǎn)移酶α4Gn-T抗體

AADAC英文名稱:芳香乙酰胺脫乙?;缚贵w

AADACL4英文名稱:芳香乙酰胺脫乙?;笜拥鞍?抗體

AASDHPPT英文名稱:氨基乙二酸半醛脫氫酶磷酸泛酰巰基乙胺轉(zhuǎn)移酶抗體

AASS英文名稱:賴氨酸酮戊二酸還原酶抗體

ANKRD6英文名稱:錨蛋白重復(fù)域6抗體

Arginase II英文名稱:精氨酸酶2抗體

AKR1C3英文名稱:醛固酮還原酶家族1成員C3抗體

ACTHR英文名稱:促腎上腺皮質(zhì)激素受體

AGRP英文名稱:褐黑素相關(guān)蛋白ART抗體

Adrenodoxin英文名稱:腎上腺皮質(zhì)線粒體鐵氧還蛋白抗體

Adracalin英文名稱:Allgrove綜合征相關(guān)蛋白抗體

AAV5 capsid protein VP1英文名稱:腺相關(guān)病毒5 VP1抗體


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