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在制備髓過氧化物酶（MPO）卵白蛋白偶聯(lián)物及偶聯(lián)小分子/CP的操作步驟中，完成初步的實驗設計與材料準備后，接下來進入關鍵的反應與偶聯(lián)階段。
首先，將MPO與卵白蛋白進行偶聯(lián)時，需確保兩者在適宜的pH值和離子強度條件下混合，以維持蛋白質的結構穩(wěn)定性。通過控制反應時間和溫度，利用化學交聯(lián)劑如戊二醛或琥珀酰亞胺酯等，促進MPO與卵白蛋白之間的共價鍵形成。反應完成后，需通過透析或超濾等方法去除未結合的蛋白質和交聯(lián)劑，得到純凈的MPO-卵白蛋白偶聯(lián)物。
對于MPO偶聯(lián)小分子或CP（可能指某種化合物或藥物）的操作，則需根據(jù)小分子的性質選擇合適的偶聯(lián)策略。若小分子含有可反應的官能團，如氨基、羧基等，可直接與MPO上的相應位點進行偶聯(lián)。若小分子無合適官能團，則需通過引入活性基團或利用載體分子進行間接偶聯(lián)。偶聯(lián)過程中，同樣需精確控制反應條件，以避免MPO生物活性的喪失。
最后，對偶聯(lián)產(chǎn)物進行嚴格的表征與驗證，包括SDS-PAGE電泳、質譜分析以及生物活性測定等，以確保偶聯(lián)物的成功制備及其預期的生物學功能。通過這一系列精細的操作步驟，我們能夠為后續(xù)的生物學實驗和臨床應用提供高質量的MPO偶聯(lián)物。
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