FBS胎牛血清解凍方法可使用國(guó)際上推薦的三步法融化解凍,可盡可能減少沉淀出現(xiàn),保留血清中因子的活性。
要點(diǎn)一:此三步融化法,適用于所有血清,在水浴過程中,血清的平面要盡量浸在水中,但瓶口不要沒入水中,防治瓶口污染。在融化過程中要經(jīng)常慢慢搖動(dòng)瓶身,使血清混勻,但搖動(dòng)不要?jiǎng)×?,盡量不要產(chǎn)生泡沫!
要點(diǎn)二:如果你的血清平時(shí)是儲(chǔ)存在-80℃的血清,融化前則需提前幾天先轉(zhuǎn)移至-20℃冰箱中復(fù)溫(至少24小時(shí)),再使用三步法溶解,避免溫差過大,更易導(dǎo)致血清中蛋白凝集。
要點(diǎn)三:為**限度保留血清中因子的活性,減少凍融次數(shù),血清應(yīng)遵循現(xiàn)用現(xiàn)配,現(xiàn)配現(xiàn)解凍的原則。解凍的血清,應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,將其分裝,保證每一份夠一次使用量即可,比如:25ml/管、50ml/管等。分裝好的血清,密封好后,立即放回-20℃冰箱繼續(xù)冷凍儲(chǔ)存。需要配制培養(yǎng)基的時(shí)候,再?gòu)?20℃冰箱中取出一管來盡快解凍使用(能全部配成培養(yǎng)基,不要有剩余),配好的培養(yǎng)基在4℃冰箱儲(chǔ)存不超過一周。