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mIHC在結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移機(jī)制方面的應(yīng)用分享：
 

免疫選擇條件下腫瘤轉(zhuǎn)移的時(shí)空演化——作者運(yùn)用縱向數(shù)據(jù)對(duì)比研究了免疫微環(huán)境如何影響結(jié)直腸癌在不同轉(zhuǎn)移器官中的腫瘤演化。通過(guò)多重分析，作者還發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)移過(guò)程中的克隆進(jìn)化模式取決于轉(zhuǎn)移部位的免疫環(huán)境。 
文章展示了多重?zé)晒饷庖呓M化技術(shù)的多種應(yīng)用和數(shù)據(jù)分析策略，今天我們就來(lái)詳細(xì)解讀一下。 

文章利用了多指標(biāo)和多分析策略來(lái)對(duì)免疫逃逸機(jī)制進(jìn)行分析，建立了腫瘤轉(zhuǎn)移的免疫評(píng)價(jià)體系。尤其是作者對(duì)Ki67+腫瘤細(xì)胞和CD3+細(xì)胞之間的空間鄰近性分析，使得我們可以觀察到新抗原缺失的新的遺傳證據(jù)。同時(shí)還揭示了復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)與免疫得分、免疫編輯和腫瘤負(fù)荷之間的關(guān)系。 

兩例大腸癌患者P210和P45的生物標(biāo)本收集點(diǎn)解剖圖。從轉(zhuǎn)移灶M8（a和b，P45）切出兩個(gè)連續(xù)的玻片。多區(qū)域切除標(biāo)本取自M07的一個(gè)大的腫瘤組織（M07n）及其周圍的腫瘤組織，以及P210患者的一個(gè)巨大的轉(zhuǎn)移瘤，M10（四個(gè)位置b1–4，尺寸25 mm）。 

作者用三個(gè)指標(biāo)來(lái)量化免疫浸潤(rùn)：全玻片免疫細(xì)胞密度（WS）、三個(gè)浸潤(rùn)密度比較高的區(qū)域即熱點(diǎn)密度（HSs），腫瘤中心（CT）CD3+/CD8+T細(xì)胞密度及其浸潤(rùn)邊緣（IM）的免疫得分。作者運(yùn)用一組7指標(biāo)（單張4指標(biāo)5色）的多重?zé)晒饷庖呓M化片子繪制了腫瘤微環(huán)境中免疫細(xì)胞的空間分布圖。 

腫瘤微環(huán)境中T細(xì)胞（橙色）和增殖性腫瘤細(xì)胞（藍(lán)色，CK+Ki67+）的空間分布模式圖。——兩點(diǎn)之間的連接表示近距離細(xì)胞。LoNo、HiNo和HiYes三組的分布圖顯示T細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的短距離在減少。Pies圖顯示了在CT觀察到的增殖性（頂部）和非增殖性腫瘤細(xì)胞（底部）旁邊的CD3 T細(xì)胞百分比，無(wú)論是增殖性還是非增殖性腫瘤細(xì)胞附近，T細(xì)胞都在增多。星號(hào)則強(qiáng)調(diào)了樣本組之間在比例上的顯著差異。 
多重?zé)晒饷庖呓M化圖提供了很好的空間定位佐證。 

多重?zé)晒饷庖呓M化文獻(xiàn)解讀——總結(jié)

基于以上研究成果，作者提出了一個(gè)解釋腫瘤轉(zhuǎn)移進(jìn)展的平行選擇模型，其中分支可以追溯到免疫逃逸克隆。這一發(fā)現(xiàn)有助于提高我們對(duì)腫瘤擴(kuò)散的認(rèn)識(shí)和免疫治療學(xué)的發(fā)展。

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多六指標(biāo)七色（含DAPI）的多色免疫組化服務(wù)（芯片多四指標(biāo)五色），樣本涵蓋石蠟切片、冰凍切片及組織芯片（TMA），組織大片請(qǐng)?zhí)峁﹩螇K組織切片，F(xiàn)FPE樣本，厚度3-5um。正式實(shí)驗(yàn)是每例2張，1張備用。預(yù)實(shí)驗(yàn)樣本數(shù)量根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)方案定。

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2.客戶區(qū)域的單細(xì)胞分析結(jié)果：

• 單陽(yáng)性細(xì)胞占有核細(xì)胞百分比，密度。
• 雙陽(yáng)性細(xì)胞占有核細(xì)胞百分比，密度。
• 組織面積和特定病理形態(tài)面積計(jì)算。
• TMA提供每個(gè)芯點(diǎn)的以上定量結(jié)果。

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產(chǎn)品特點(diǎn)： 可快速完成高至六指標(biāo)七色的熒光多標(biāo)記； 染料經(jīng)過(guò)優(yōu)化處理，相比普通染料，強(qiáng)度更高，持續(xù)時(shí)間更長(zhǎng)； 有組化經(jīng)驗(yàn)即可操作，染色無(wú)需特殊儀器，提供詳細(xì)的protocol