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生化檢測(cè)試劑盒 | 銅離子檢測(cè)助力腫瘤治療研究

閱讀:1196      發(fā)布時(shí)間:2023-12-5
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背景介紹:

 

銅濃度檢測(cè)在藥物發(fā)現(xiàn)和環(huán)境監(jiān)測(cè)中得到廣泛應(yīng)用。銅是人體必需的微量元素。銅蛋白酶在鐵和兒茶酚胺代謝,在清除自由基,血紅蛋白,彈性蛋白,膠原等方面扮演著重要角色。銅主要存在于肝臟中的銅藍(lán)蛋白中。銅含量過(guò)低會(huì)導(dǎo)致智力低下、色素缺失、貧血、肌肉緊張癥、骨質(zhì)壞血病等疾病。

 

銅離子檢測(cè)在腫瘤研究中的應(yīng)用:

 

歷史研究表明,銅穩(wěn)態(tài)失調(diào)與多種腫瘤有關(guān),如婦科腫瘤、結(jié)直腸癌等,而癌癥患者血清銅水平的升高與癌癥分級(jí)和化療耐藥性有關(guān),如果銅的濃度超過(guò)一定的閾值,就會(huì)中毒,導(dǎo)致一種新細(xì)胞死亡形式,稱(chēng)為銅中毒,這種方式也被視為癌癥治療的潛在方法。

 

2023年10月20日,上海市第一人民醫(yī)院黃陳教授和范廣建教授團(tuán)隊(duì)在Nature Communications雜志上發(fā)表了題為“Lactylation of METTL16 promotes cuproptosis via m6A-modification on FDX1 mRNA in gastric cancer"的研究論文。本研究揭示了METTL16調(diào)控胃癌細(xì)胞銅死亡的分子機(jī)制,闡明乳酰化修飾及m6A修飾在胃癌進(jìn)展中的重要意義,為胃癌的治療提供新的靶標(biāo)和策略。


圖 運(yùn)用銅離子檢測(cè)試劑盒abs580140對(duì)48例胃癌患者的胃癌組織裂解物進(jìn)行了銅含量檢測(cè)

 

銅離子檢測(cè)試劑盒:


試劑盒組分

規(guī)格

儲(chǔ)存條件

96-Well Microplate

1 plate

常溫

Assay Buffer

30 mL x 4

4℃

Reaction Buffer

4 mL x 1

4℃

Masking Reagent

Powder x 1

4℃

Dye Reagent

Powder x 1

4℃,避光保存

Dye Reagent Diluent

1 mL x 1

4℃

Standard (250 μmol/L)

1 mL x 1

4℃




 

另需自備的材料:酶標(biāo)儀(可讀取605nm處的吸光度)、蒸餾水、移液器與槍頭、離心機(jī)、計(jì)時(shí)器等。

 

操作步驟(以組織樣本為例):

 

1、樣本處理:稱(chēng)取1g組織,與1mL Assay buffer在冰上勻漿,10000g 4℃離心10min,取上清液至新離心管中,冰上保存待檢測(cè)。


2、試劑準(zhǔn)備:


標(biāo)準(zhǔn)品:用蒸餾水二倍連續(xù)稀釋標(biāo)準(zhǔn)品;


圖 標(biāo)準(zhǔn)品二倍連續(xù)稀釋示例

 

Masking Reagent:使用1mL蒸餾水溶解(現(xiàn)配現(xiàn)用);
Dye Reagent:使用1mL Dye Reagent Diluent溶解Dye Reagent,70℃加熱助溶(現(xiàn)配現(xiàn)用)。


3、上樣:分別將140uL不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、樣品加入相應(yīng)孔中,另設(shè)置空白孔加入140uL蒸餾水;每孔分別加入40uL Reaction Buffer,10uL Masking Reagent以及10uL Dye Reagent,混合均勻,室溫孵育15min。

 

試劑

標(biāo)準(zhǔn)品孔

樣品孔

空白孔

標(biāo)準(zhǔn)品

140uL

--

--

樣品

--

140uL

--

蒸餾水

--

--

140uL

Reaction Buffer

40uL

40uL

40uL

Masking Reagent

10uL

10uL

10uL

Dye Reagent

10uL

10uL

10uL

 








4、檢測(cè)與計(jì)算:使用酶標(biāo)儀測(cè)量605nm處的吸光度,擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線并計(jì)算樣本濃度。


圖 標(biāo)曲示例

 

注意事項(xiàng):

 

1)金屬螯合劑(如EDTA)會(huì)干擾此分析,在樣品制備中應(yīng)避免使用;
2)對(duì)于未知的樣品,建議多做幾個(gè)稀釋梯度進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn),確保讀數(shù)在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi);
3)試劑盒中的Dye Reagent需要現(xiàn)配現(xiàn)用,配好的溶液無(wú)法儲(chǔ)存,可能影響顯色讀數(shù)進(jìn)而影響檢測(cè);如果樣本需要分批檢測(cè),建議分批收樣儲(chǔ)存,待樣本收齊后統(tǒng)一檢測(cè);
4)每次實(shí)驗(yàn)必須重新檢測(cè)并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。


Absin生化檢測(cè)試劑盒——離子檢測(cè)系列:


貨號(hào)

品名

用途

abs580105

鐵離子檢測(cè)試劑盒

鐵離子(Fe3+)含量檢測(cè)

abs580140

銅離子檢測(cè)試劑盒

銅離子(Cu2+)含量檢測(cè)

abs580188

硒離子檢測(cè)試劑盒

硒離子含量檢測(cè)

abs580103

鉀離子檢測(cè)試劑盒

鉀離子(K+)含量檢測(cè)

abs580104

鈣離子檢測(cè)試劑盒

鈣離子(Ca2+)含量檢測(cè)

abs580106

鎂離子檢測(cè)試劑盒

鎂離子(Mg2+)含量檢測(cè)

abs580107

磷離子檢測(cè)試劑盒

磷離子含量檢測(cè)

abs580108

鋅離子檢測(cè)試劑盒

鋅離子(Zn2+)含量檢測(cè)

abs580110

孔雀綠磷離子檢測(cè)試劑盒

孔雀綠磷離子含量檢測(cè)

abs580146

鉻離子檢測(cè)試劑盒

鉻(Cr)離子含量檢測(cè)





 

好消息!Absin文獻(xiàn)獎(jiǎng)勵(lì)重磅升級(jí)!

 


Absin特色產(chǎn)品線:

WB相關(guān):ECL發(fā)光液、預(yù)染marker、預(yù)制膠;IHC相關(guān):二抗試劑盒、組化筆;IP/CoIP試劑盒;激動(dòng)劑/抑制劑;血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE;凋亡試劑盒;呼吸爆發(fā)試劑盒;ELISA試劑盒;重組蛋白;抗體: 二抗、標(biāo)簽抗體、對(duì)照抗體;定制服務(wù)(抗體/多肽/蛋白/標(biāo)記/檢測(cè))...

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