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一、背景介紹

Ni-IDA Pharose FF是含亞氨基二乙酸(iminodiacetic acid, IDA)基團(tuán)的金屬螯合填料，以瓊脂糖微球?yàn)榛|(zhì)，通過活化偶聯(lián)亞氨基二乙酸(IDA)，再螯合Ni2+。適用于大部分帶組氨酸標(biāo)簽(His-tag)蛋白的親和層析。

Ni-NTA Sepharose FF是含次氮基三乙酸(NTA)基團(tuán)的金屬螯合填料， 以瓊脂糖微球?yàn)榛|(zhì)，通過活化偶聯(lián)次氮基三乙酸(NTA)，再螯合Ni2+。與亞氨基二乙酸(IDA)相比，具有更好的螯合劑、還原劑、堿性的耐受性。主要用于帶組氨酸標(biāo)簽(His-tag)蛋白的親和層析。

圖1 Ni-IDA瓊脂糖凝膠FF系列使用流程圖

圖2 Ni-NTA瓊脂糖凝膠FF系列使用流程圖

二、標(biāo)簽蛋白純化填料參數(shù)

注：

a：90%體積以上的微球在此粒徑范圍；

b：DBC10%測(cè)試條件為：10%流穿，大腸桿菌表達(dá)帶組氨酸標(biāo)簽的重組蛋白，6min停留時(shí)間。

三、應(yīng)用數(shù)據(jù)：

圖3 Lane M： Marker

Lane 1 ：Start material

Lane 2: Flowthrough 1

Lane 3: Flowthrough 2

Lane 4: Elution (20 mM Imidazole)

Lane 5: Elution (50 mM Imidazole)

Lane 6: Elution (100 mM Imidazole)

Lane 7: Elution (200 mM Imidazole)

Lane 8: Elution (300 mM Imidazole)

Lane 9: Elution (500 mM Imidazole)

填料： Ni-IDA 瓊脂糖凝膠FF（重力預(yù)裝柱）（Cat: abs91007-G），1mL

樣品：his6 -tagged recombinant Streptococcus Protein G produced in E. coli

結(jié)合緩沖液：20mM PB, 150mM NaCl, pH7.4

洗脫緩沖液：20mM PB, 150mM NaCl, 20-500 mM Imidazole, pH7.4

圖4 填料：Ni-NTA 瓊脂糖凝膠FF（中壓預(yù)裝柱）（Cat: abs91008-M），1mL

樣品：his6 -tagged recombinant Streptococcus Protein G produced in E. coli

結(jié)合緩沖液：20mM PB, 150mM NaCl, pH7.4

洗脫緩沖液：20mM PB, 150mM NaCl, 20-500 mM Imidazole, pH7.4

表 NTA系列?屬螯合填料的耐受性

四、愛必信標(biāo)簽蛋白純化填料產(chǎn)品信息

Absin產(chǎn)品線：

爆款產(chǎn)品：爆款試劑盒(mIHC、IHC、凋亡、ELISA、ChIP、Co-IP、TR-FRET、生化檢測(cè)、殘留檢測(cè)、多因子檢測(cè))；細(xì)胞培養(yǎng)(類器官試劑盒+基質(zhì)膠，胎牛血清+培養(yǎng)添加劑+細(xì)胞因子)、分化試劑盒；分子(mRNA合成服務(wù)+提取試劑盒)；化合物大包裝；輔助試劑、耗材/儀器、定制服務(wù)(抗體/多肽/蛋白/標(biāo)記/檢測(cè))...

特色產(chǎn)品：雞胚提取物CEE、B27、N2、霍亂毒素B亞單位CTB、牛腦垂體提取物BPE、百日咳毒素PTX、重組人胰島素Insulin、人源低密度脂蛋白LDL...