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CANDOR Bioscience優(yōu)質(zhì)ELISA產(chǎn)品在實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用

時(shí)間:2021-11-9 閱讀:1665
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一提到ELISA,各位做科研的小伙伴都很熟悉,不就是簡(jiǎn)單的抗原抗體反應(yīng)嘛?但這“簡(jiǎn)單的免疫反應(yīng)",往往在實(shí)際操作中一個(gè)不小心,結(jié)果就會(huì)相差甚遠(yuǎn),甚至功虧一簣,假陽(yáng)性或者假陰性會(huì)讓人焦頭爛額,那么,到底要怎樣快速有效的得到可靠的ELISA結(jié)果呢?

 

今天小編給大家?guī)?lái)的是一家位于德國(guó)的專(zhuān)業(yè)生產(chǎn)免疫優(yōu)化試劑的公司-——candor bioscience,它專(zhuān)注于ELISA各個(gè)環(huán)節(jié)中的試劑,為廣大研究者提供超過(guò)50種不同類(lèi)型的產(chǎn)品,包括優(yōu)化試劑,封閉試劑,穩(wěn)定劑和免疫實(shí)驗(yàn)緩沖液。通過(guò)使用這些試劑,可以幫助您提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性,簡(jiǎn)化實(shí)驗(yàn)步驟,減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間。

 

接下來(lái),小編將通過(guò)Sandwich-ELISA的實(shí)驗(yàn)過(guò)程像大家展示candor bioscience優(yōu)質(zhì)ELISA產(chǎn)品在實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用。



第一步,抗體的包被:

Coating Buffer 1x(貨號(hào)120/121)將抗體稀釋至0.1 - 10 µg/mL。在酶標(biāo)板反應(yīng)孔中加100-150 µL包被好的抗體,4℃孵育過(guò)夜或室溫孵育1-4 h。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用Washing Buffer 1x Washing Buffer 10x TRIS, 貨號(hào)145)洗板3 -5次,每次3 min


第二步,封閉與穩(wěn)定:

用表面封閉劑來(lái)充填空隙,從而排除ELISA后的步驟中干擾物質(zhì)的再吸附。推薦使用的表面封閉劑如The Blocking Solution(貨號(hào)110),SmartBlock™(貨號(hào)113),BSA-Block(貨號(hào)115)。每個(gè)空中加入200 µl的表面封閉劑,室溫孵育1-2 h后,棄去孔內(nèi)溶液,用Washing Buffer 1x Washing Buffer 10x TRIS, 貨號(hào)145)洗板3 -5次,每次3 min。

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如果想保持ELISA板包被狀態(tài)的長(zhǎng)期穩(wěn)定,這個(gè)步驟就是必選的??梢赃x用Liquid Plate Sealer®(貨號(hào)160)進(jìn)行ELISA板的穩(wěn)定,向每個(gè)孔中加入200 µlLiquid Plate Sealer®,室溫孵育15-90 min,棄去孔內(nèi)溶液,在37-45 ℃條件下干燥1-2 h,這樣處理后的板子放在密封袋中,在干燥、2-8 ℃的環(huán)境中保存1-3 年的時(shí)間。

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第三步,添加樣品或校準(zhǔn)液(雙重測(cè)量)

在孔中加入100-150 µL用樣品稀釋液稀釋后的樣品以及標(biāo)準(zhǔn)液,室溫孵育30 min,棄去孔內(nèi)溶液,用Washing Buffer 1x Washing Buffer 10x TRIS, 貨號(hào)145)洗板3 -5次,每次3 min。

 

推薦使用candor bioscience優(yōu)質(zhì)buffer

1. LowCross-Buffer®(貨號(hào)100),有助于減少交叉反應(yīng)、基質(zhì)效應(yīng)和非特異性結(jié)合等干擾。將干擾降到zui低,提升了分析的質(zhì)量與結(jié)果的可靠性。

2. Sample Buffer(貨號(hào)105),適合在無(wú)干擾的情況下使用。

3. Antibody Stabilizer(貨號(hào)130/131),可以在2-8°C下長(zhǎng)期儲(chǔ)存蛋白質(zhì)或抗體的穩(wěn)定劑

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第四步,加入標(biāo)記抗體并檢測(cè):

向每個(gè)孔中加入100-150 µl的標(biāo)記抗體(HRP,辣根過(guò)氧化物酶;AP、堿性磷酸酶等),室溫孵育2-4 h,棄去孔內(nèi)溶液,用Washing Buffer 1x Washing Buffer 10x TRIS, 貨號(hào)145)洗板3 -5次,每次3 min,進(jìn)行底物檢測(cè)(如過(guò)氧化物酶的TMB)。

 

推薦使用candor bioscience優(yōu)質(zhì)buffer

1.HRP-Protector™(貨號(hào)222, 用于在2-8℃長(zhǎng)期保存HRP-結(jié)合物。

2. AP-Protector®(貨號(hào)235),用于2-8℃長(zhǎng)期保存AP-結(jié)合物,還可直接用于AP偶聯(lián)物的培養(yǎng)。

3. LowCross® HRP-Stab(貨號(hào)270),用于在2-8℃長(zhǎng)期保存HRP結(jié)合物,可以最大限度地減少非特異性結(jié)合、交叉反應(yīng)和基質(zhì)效應(yīng),中和干擾(包括 HAMA 的衍生干擾)。

4. LowCross-Buffer®(貨號(hào)100),有助于減少交叉反應(yīng)、基質(zhì)效應(yīng)和非特異性結(jié)合等干擾。將干擾降到zui低,提升了分析的質(zhì)量與結(jié)果的可靠性。

5. Sample Buffer(貨號(hào)105),適合在無(wú)干擾的情況下使用。





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